基于TaqMan实时荧光PCR检测鲜肉及加工肉制品中的驴源-肉类研究.PDF

62 2018, Vol. 32, No. 4 肉类研究 中国肉类食品综合研究中心 分析检测 MEAT RESEARCH CHINA MEAT RESEARCH CENTER Taq 基于 Man实时荧光PCR检测鲜肉及 加工肉制品中的驴源性成分 海 小，刘国强，罗建兴，郭 梁* （锡林郭勒职业学院生物工程研究院，锡林郭勒食品检验检测和风险评估中心，内蒙古锡林浩特 026000 ） 摘  要： / 根据出入境检验检疫行业标准SN T 3730.4—2013 《食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法 第4部分：驴 Taq 成分检测 实时荧光PCR法》合成引物和探针，利用 Man实时荧光聚合酶链式反应（polymerase chain reaction ， PCR ）技术检测鲜肉及加工肉制品中的驴源性成分。首先对13 种不同动物鲜肉组织的DNA进行驴源性成分特异 性检测，然后对驴源性DNA模板原液进行梯度稀释，检测方法灵敏度，最后在加工肉制品中检测方法的适用性。 结果表明：本研究建立的方法特异性强，除驴肉外，牛、羊、猪、马、骆驼、鹿、狗、兔、鸡、鸭、鸽子、鹌鹑 12 种动物鲜肉组织均无特异性扩增；方法的灵敏度较高，驴组分DNA 的检出限可达100 fg/μL ，灵敏度可达0.01%； 方法的适用性较广，可以用于加工肉制品中驴源性成分的检测。 Taq 关键词： Man实时荧光PCR技术；鲜肉及加工肉制品；驴源性成分；特异性；灵敏度 Identification of Donkey-Derived Ingredients in Raw and Processed Meats Using TaqMan Probe Based Real-Time Polymerase Chain Reaction * HAI Xiao, LIU Guoqiang, LUO Jianxing, GUO Liang (Xilingol Food Testing and Risk Assessment Center, Institute of Bioengineering, Xilingol Vocational College, Xilinhot 026000, China) Abstract: In this study, we synthesized a set of primers and TaqMan probe according to the industry standard / (SN T 3730.4—2013) for the detection of donkey-derived ingredients in raw and processed meats by real-time fluorescence polymerase chain reaction (PCR). The specificity of the primers and probe were tested using DNA templates extracted from raw meats from donkey and 12 other animal species