案例分析·呼吸道标本中1株奇异劳特普罗菌的分离及-临床检验杂志.PDF

临床检验杂志２０１８年１０月第３６卷第 １０期　 ＣｈｉｎＪ Ｃｌｉｎ Ｌａｂ Ｓｃｉ，Ｓｅｐ． ２０１８，Ｖｏｌ．３６，Ｎｏ．１０ ·７２１· ＤＯＩ：１０．１３６０２／ ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｃｌｓ．２０１８．１０．０２ ·案例分析 · 呼吸道标本中１株奇异劳特普罗菌的分离及鉴定 １ ２ ３ 林玉玲 ，林建芬 ，陈峰 （１． 福建医科大学附属泉州第一医院检验科，福建泉州３６２０００；２． 温州市中西医结 合医院检验科，浙江温州３２５０００；３． 上海交通大学医学院附属新华医院检验科，上海２０００９２） 摘要：目的　 探讨奇异劳特普罗菌（Ｌａｕｔｒｏｐｉａ ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）的生物学特性。 方法　 对一住院患者多次合格痰样本中分离的１株奇 异劳特普罗菌行革兰染色、抗酸染色等形态学观察；采用微量生化反应管验证其生化反应；应用基质辅助激光解吸电离飞行 时间质谱（ＭＡＬＤＩ⁃ＴＯＦ ＭＳ）及１６ＳｒＤＮＡ测序对其进行鉴定。 结果　 该菌在５％ ＣＯ ３５ ℃血平板上培养２４～４８ｈ形成大小不 ２ 等、白至浅黄色、粗糙、不溶血、干燥、呈“咬琼脂”现象的菌落；革兰染色呈革兰阴性不规则球状体，抗酸染色阴性；主要微量生 化反应阳性结果包括脲酶、葡萄糖、麦芽糖、硝酸盐还原试验，阴性结果包括乳糖、蔗糖、苯丙氨酸脱氨酶、ＶＰ、吲哚、鸟氨酸、赖 氨酸、枸橼酸、甘露醇；ＭＡＬＤＩ⁃ＴＯＦ ＭＳ鉴定结果为奇异劳特普罗菌（Ｌａｕｔｒｏｐｉａ ｍｉｒａｂｉｌｉｓ，Ｓｃｏｒｅ ２．１３０），１６Ｓ ｒＤＮＡ鉴定确证为奇 异劳特普罗菌（Ｌａｕｔｒｏｐｉａ ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）。 结论　 该菌菌落及镜下菌体形态不规则，目前基于ＭＡＬＤＩ⁃ＴＯＦ ＭＳ 的鉴定手段快速且 准确。 关键词：奇异劳特普罗菌；细菌鉴定；１６Ｓ ｒＤＮＡ 中图分类号：Ｒ４４６．５　 　 　 　 文献标志码：Ｂ ［１］ 　 　 １９９４年Ｇｅｒｎｅｒ⁃Ｓｍｉｄｔ等 首次对奇异劳特普罗 Ｔｈｅｒｍａｌ Ｃｙｃｌｅｒ，ＰＣＲ 仪 （德国 Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ 公司）。 菌（Ｌａｕｔｒｏｐｉａ ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）进行描述，随后 １９９７ 年在 １ ＢｉｇＤｙｅ Ｔｅｒｍｉｎａｔｏｒｖ３．１测序试剂盒（美国Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉ⁃ ［２］ ｏｓｙｓｔｅｍｓ公司）；血琼脂平板、麦康凯平板、含万古霉 例囊性纤维化患者痰标本中连续２次检出该菌 。 据对 ５００ 例囊性纤维化患者痰标本的筛查发现， 素巧克力平板（上海科玛嘉微生物公司）；快速革兰 ［３］ 染液、抗酸染液（珠海贝索生物科技公司）；细菌微 １２％患者样本检出奇异劳特普罗菌 。 在 ＨＩＶ 感 染的儿童口腔里可分离到大量奇异劳特普罗菌，该 量生化反应管（杭州滨和微生物试剂公司）；ＰＣＲ扩 菌在ＨＩＶ感染者口腔及牙周疾病中发挥的作用有 增试剂盒、聚合酶链反应引物及 ＤＮＡ 回收试剂盒 ［４］ （上海生工生物工程公司）。 待调查 。 亦有该菌分离自血液、无菌体液样本的 报道，提示奇异劳特普罗菌可能会引起侵袭性疾 １．３　 细菌培养　 将患者痰标本接种于血平板、麦康 ［５］ 凯平板、含万古霉素巧克力平板，置３５ ℃ ５％ ＣＯ 病 。 笔者２０１８年２月于 １位住院患者连续３次 ２ 合格痰标本中分离出此菌，现对其生物学特性及其 培养２４～４８ ｈ。 鉴定过程报道如下。 １．４　 涂片染色及手工生化　 挑取血平板上菌落进 行快速革兰染色及抗酸染色；行氧化酶及触酶试验。 １　 材料与方