CaMKII基因在运动抗心脏功能增龄衰退中的作用.pdfVIP

分类号 密级 学校代码 !鳗垒全 学号2Q】2Q2l墨12垦Q CaMKII基因在运动抗心脏功能增龄衰退中 的作用 roI eofCAM／(／Ii n rotecti ve onthe Study p ● 一一 一 I ■ on I neart ettectS Otexerci se agng 研究生姓名 田旭 指导教师姓名、职称 郑澜教授 学 科 专 业 运动人体科学 研 究 方 向 心血管运动适应 注：教育部博士点基金资助项目(20134306110009) 体适能与运动康复湖南省重点实验室开放基金资助项目(12pfer001) 运动科学湖南省研究生培养创新基地开放基金资助项目(CXJ 湖南师范大学学位评定委员会办公室 二零一五年五月 万方数据 摘 要 黜 1研究目的 基于Ca2+信号通路基因表达改变可能是增龄果蝇心脏功能衰退 和运动抗心脏功能增龄衰退的潜在机理之一的设想，利用定位 UAS．RNAi系统筛选增龄果蝇心功能密切相关心肌Ca2+信号调控基 因。以筛选结果为基础，研究候选基因CaMKII心肌沉默对增龄果蝇 心脏运动适应效应的影响，从心脏功能，活动指数，攀爬能力和生命 周期四个方面综合评价CaMKII基因在运动延缓心脏功能增龄衰退效 应中的作用。 2研究方法 经过同源基因查找及比对分析，选定与哺乳动物心肌细胞Ca2+ 信号通路高度保守的果蝇基因作为目标基因。基于定位UAS-RNAi 系统，将心脏特异性Gal4品系果蝇分别与UAS序列控制下Ca2+信号 基因RNAi品系果蝇杂交，构建单个Ca2+信号基因心肌组织沉默品系 果蝇。采用M．mode方法对1周龄(约为人类青少年时期)和5周龄(约 为人类中老年时期)成体果蝇心脏功能衰退相关FS、址、FL等指标 进行检测，筛选出增龄果蝇心功能密切相关心肌Ca2+信号调控基因作 为候选基因。 构建候选基因CaMKII心肌组织沉默表型，全身沉默表型和正常 表达品系，每个品系设安静对照组和运动组。应用新型果蝇运动装置 对运动组果蝇进行为期3周规律运动训练，采用M．mode方法观察安 静对照组和运动组运动训练期前后心脏功能增龄衰退相关缩短分数、 节律不齐指数、纤维性颤动时间等指标变化。在果蝇运动训练期结束 后，使用DAMS3系统监测每个组别果蝇昼夜活动节律变化，摄像评 万方数据 定果蝇攀爬能力，统计不同组别果蝇存活率，制作生存曲线，综合研 究CaMKII基因在运动延缓心脏功能增龄衰退效应的作用。 3研究结果 析结果 的剪切体亚型序列对比结果显示，序列一致性均在74％以上，序列相 基因与人类同源基因CaMKIIc多高度保守。 3．2qRT-PCR检测结果 Real-t