血清AFP、CA125、CA199、CEA联检对原发性肝癌的诊断.doc

PAGE PAGE 1 血清AFP、CA125、CA199、CEA联检对原发性肝癌的诊断 【摘要】目的探讨多种肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对原发性肝癌的诊断价值。方法用该检测系统测定分析162例原发性肝癌（PHC）患者，129例良性肝病患者和140例正常人血清4种常见标志物（AFP、CA125、CA199、CEA）的水平。结果PHC阳性率为83.95%，显著高于良性肝病组（40.31%）和正常对照组（5.71%）（P均lt;0.01）；联合检测在提高PHC诊断敏感性（Plt;0.01）的同时，特异性有所下降（Plt;0.01）。结论运用蛋白芯片技术联合检测多种肿瘤标志物可以提高PHC诊断的敏感性。 【关键词】肝肿瘤；肿瘤标记，生物学；蛋白芯片；血清标志物 　　原发性肝癌（primaryhepaticcancer，PHC）在我国农村和城市分别处于恶性肿瘤病死率的第一、第二位，全世界每年有38.6万人死于肝癌，其中４５%在中国［1］。甲胎蛋白（AFP）多年来被作为诊断PHC的首选指标，但有２０％～４０％的PHC患者ＡＦＰ阴性或低值［2］。为提高PHC血清标志物检测的灵敏度，本实验利用蛋白芯片技术联合检测PHC病人血清AFP、糖原125（CA125）、糖原199（CA199）、癌胚抗原（CEA）等四项指标，探讨其对PHC的诊断意义。 　　1对象和方法 　　1.1对象肝癌组162例PHC患者来自本院附属医院住院及门诊病人，其中男102例，女60例，平均46.3岁，均通过病理检查确诊；良性肝病组129例，其中肝硬化42例，肝炎87例，男78例，女51例，平均41.3岁；正常对照组140例，均为门诊健康查体者，其中男90例，女50例，平均40.7岁。 　　1.2方法 　　1.2.1样品的采集所有研究对象均于早晨空腹静脉采血3ml，分离血清，立刻检测。 　　1.2.2仪器和试剂试剂盒为湖南数康生物科技有限公司生产的C-12型肿瘤诊断用蛋白芯片试剂盒（简称C-12），并采用其提供的HD-2001A生物芯片检测仪分析结果。 　　1.2.3实验方法将各待测血清及不同浓度的标准品混合液各100μl滴加到不同的芯片分格内；将蛋白芯片在37℃温育振荡30min，倾倒弃去孔内液体；吸取200μl洗涤液加入芯片格内，振荡洗涤5min，弃去洗涤液；重复洗涤2次；每芯片分格内各加入100μl反应液，再次将蛋白芯片在37℃温育振荡30min，然后倾倒弃去孔内液体，按上述方法重复洗涤2次，剥离蛋白芯片集成块的上部，在每个芯片的膜表面加入20μl已等体积混合15min的检测液A和B混合液，静置2min，重复洗涤2次，用HD-2001A生物芯片检测仪对蛋白芯片读取数据。 　　1.2.4检测项目的正常参考值范围CA125＜35ku/L，CA199＜35ku/L，AFP＜20μg/L，CEA＜5μg/L。测定结果超过正常参考值范围上限即为阳性。 　　1.3统计学处理计数资料采用χ2检验进行分析。 　　2结果 　　2.1正常组、良性肝病组、肝癌组四项指标检测结果见表1。肝癌组的阳性率显著高于良性肝病组和正常对照组（P均lt;0.01）。采用蛋白芯片联合检测AFP、CA125、CA199、CEA等四项指标，可将肝癌的诊断阳性率提高到83.95%，特异性为77.70%，阳性预测值为69.39%，阴性预测值为88.94%，有效性为80.05%。 　　2.2联合检测与单项检测标志物检测敏感性与特异性比较见表2。与单项标志物比较，联合检测提高了诊断敏感性（χ2=39.38，Plt;0.01），但特异性有所下降（χ2=13.31，Plt;0.01）。 　　表1正常组、良性肝病组、肝癌组四项指标检测结果（略） 　　与肝癌组比较，a:χ2=59.81，b：χ2=184.27，P均lt;0.01 　　表2联合检测与单项检测标记物检测敏感性与特异性（略） 　　3讨论 　　目前认为AFP为肝癌可靠的血清标志物，应用AFP早期诊断PHC，当AFP≥400μg/L时可确诊为PHC，且灵敏度一般为60%～70%，特异性为90%左右，但约18%的PHC患者的AFP值不升高，其原因可能是AFP含量与肿瘤体积大小有关。王果等［3］报道，肿瘤体积lt;3cm3的PHC患者的AFP含量明显低于肿瘤体积＞3cm3的PHC患者，易造成假阴性结果。还有文献报道［4］，对早期PHC、AFP的假阴性率可达40%以上，进展期PHC、AFP的假阴性率为15%～20%。因此，单凭AFP诊断PHC易造成漏诊与误诊，为提高PHC尤其是小肝癌的诊断敏感性，临床上常将多种标志物进行联合检测。生物芯片是近年来在生物科学领域中迅速发展起来的一项高新技术，它是将生物分子固定于硅片、玻璃片、塑料片、凝胶、尼龙膜等固相介质上形成的生