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技巧 · 培养基母液配制方法之大量元素母液
导读:本文以配制 MS 培养基配方为例,分为上下两部分,上半部分讲解培养基各种母液的配制方法,下半部分讲解固体培养基的配制方法。母液主要分为:大量元素母液、微量元素母液、有机物母液、铁盐母液、植物生长调节剂母液。
材料与用具
1. 药品与试剂
配制 MS 培养基母液所需的无机盐及有机物(见最后面的 MS 培养基配方表格);
植物生长调节剂(植物激素):IAA、IBA、NAA、2,4-D、6-BA、KT;95%
乙醇;1mol/L 氢氧化钠,1mol/L 盐酸;蒸馏水(或去离子水)。
2. 仪器与用具
电子分析天平(感量 0.001g)、普通天平(感量 0.1g),烧杯(100mL、500mL、1000Ml),量筒(100mL),移液管(1mL、5mL、10mL),容量瓶(250mL、500mL、1000mL),棕色广口瓶(100mL、500mL、1000mL),水浴锅、磁
力搅拌器、冰箱、药勺、标签纸、铅笔等。
配制大量元素母液的方法与步骤
将 MS 培养基配方中的各大量元素的化合物,按其所规定量的 10 倍分别在普通
天平上称重,如下表:
再分别用 100mL 烧杯加蒸馏水将其溶解,待充分溶解后将它们按顺序依次移入
1000mL 容量瓶中,并加蒸馏水定容至 1000mL;此时混合液若出现白色沉淀则
母液配制失败,若清澈透明则已配制成功。然后将已配制好的大量元素母液移入
广口瓶中,并贴上标签(标记母液名称、浓缩倍数、配制日期及以后配制 1L 培
养基时应移取的量)。最后将母液放入冰箱内保存备用。
注意事项
1、配制大量元素母液时,某些无机成分如 Ca2+、SO42-、Mg2+和 H2PO4-
等在一起可能发生化学反应,产生沉淀物。为避免此现象发生,母液配制时要用纯度高的重蒸馏水溶解,药品采用等级较高的分析纯,各种化学药品必须先以少
量重蒸馏水使其充分溶解后才能混合,混合时应注意先后顺序。特别应将 Ca2+、
SO42-、Mg2+和 H2PO4-等离子错开混合,速度宜慢,边搅拌边混合。
2、CaCl2·2H2O 要在最后单独加入,在溶解 CaCl2·2H2O 时,蒸馏水需加热
沸腾,除去水中的 CO2,以防沉淀。另外,CaCl2·2H2O 放入沸水中易沸腾,
操作时要防止其溢出。
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