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食源性致病菌快速 检测技术 北京祥龙环宇生物技术有限公司 产品技术部 孙晓明 祥龙环宇公司简介 北京祥龙环宇生物技术有限公司是 一家由留美博士联合创办的企业， 集研发、生产、销售为一体。专业 为客户提供食品安全、动植物疫病 检测试剂盒、进口化学试剂产品及 技术服务。 祥龙环宇公司合作伙伴 中国区独家代理 德国ifp公司PCR试剂盒 以色列Hylabs公司微生物快速检测板 意大利COPAN公司SRK微生物采样盒 美国BIOXL品牌ELISA药物残留试剂盒及PCR检测 试剂盒 德国Royal公司凝胶成像系统，荧光、化学发光 仪以及化学发光免疫测定试剂盒 美国LABCON公司的一次性耗材 微生物快速检测产品 以色列HYlabs公司微生物快速检测板 意大利Copan公司SRK卫生监控采样试剂盒 德国IFP公司PCRFast ®荧光及凝胶PCR检测 试剂盒 美国BioXL荧光定量及凝胶PCR检测试剂盒 主要内容 主要内容 食品微生物概念及相关定义 食品微生物检测的基本思路及常用技术 微生物快速检测方法分类 培养基方法 PCR方法 食品微生物概念 食品微生物概念 研究与食品生产或安全相关的微生物学 生产用微生物: 乳杆菌、双歧杆菌等 致病微生物: 病毒、沙门菌、致病大肠等 腐败微生物: 霉菌、酵母等 食品微生物研究的内容 食品微生物研究的内容 微生物污染的分析：菌落总数、大肠菌群等 微生物的分离：致病微生物分离、生产用微生物的分 离 传统的微生物的鉴定与分型：形态、生化、血清、噬 菌体等 微生物的分子生物学鉴定与分型：PCR、PFGE、 16sRNA等 微生物改良：提高生产效率、改变产品风味等 食源性致病菌的危害 食源性致病菌的危害 美国每源性疾病病例 325,000 需要住院治疗 5,000 死亡 前三位食源性致病细菌: 空肠弯曲菌, 沙门氏菌, 致病 性大肠杆菌 新近出现的问题: 抗生素耐药 食品微生物的重要性 食品微生物的重要性 与生产相关的微生物： 1，延长货架期 2，改变产品的风味 3，增加产品的功能：免疫调节、改善肠道菌群等 4 ，改变食品的适应人群：酸奶、奶酪 微生物检测的基本思路 微生物检测的基本思路 前增菌培养(培养基中不含抑菌剂) 选择性增菌培养或增菌培养 选择性分离培养或分离培养 生化鉴定或血清学鉴定 食品微生物鉴定与分型 食品微生物鉴定与分型 传统的分型技术： 形态学分型 生化分型 血清分型 噬菌体分型 现代方法： 微生物快速检测方法，分子生物学鉴定与分型 国内选择快速检测方法的依据 国内选择快速检测方法的依据 1、GB/T 4789.4-2008 食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验 2、GB/T 4789.30-2008 食品卫生微生物学检验 单核细胞增生 李斯特氏菌菌检验 3、GB/T 4789.36-2008 食品卫生微生物学检验大肠埃希氏菌 O157：H7NM检验 以上标准中都规定使用快速检测方法，主要是指酶底物法。 4、FDA、USDA-FSIS、ISO、AOAC等标准都有推荐使用微 生快速检测方法 微生物快速检测方法特点 微生物快速检测方法特点 1、快速：一般在几小时至24小时内； 2、灵敏度高、特异性高； 3、操作和使用比较简单； 食品微生物快速检测方法分类 食品微生物快速检测方法分类 1，显色培养基法： 检测时间相对较快，结果准确，技术成熟，产品种类很多。 2，免疫学方法： 产品最多，特异性和敏感性都很高，但有假阳性存在，阳性结果需要确 认。通常的原理有EIA，ELISA，GLISA，荧光酶免、免疫磁分离等方法。 市场上的产品多。 食品微生物快速检测方法分类 食品微生物快速检测方法分类 3，分子生物学方法： 以基因探针检测法和PCR法(包括常规PCR方法和荧光PCR