一、动物细胞制药.ppt

二、动物细胞培养的操作方式 2、半连续式操作 该方式是当细胞和培养基一起加入反应器后，在细胞增长和产物形成过程中，每间隔一段时间，取出部分培养物，或单纯是条件培养基，或连同细胞、载体一起，然后补充同样数量的新鲜培养基，或另加新鲜载体，继续培养。该操作方式在动物细胞培养和药品生产中被广泛采用，它的优点是操作简便，生产效率高，可长期进行生产，反复收获产品，而且可使细胞密度和产品产量一直保持在较高的水平。 二、动物细胞培养的操作方式 3、灌流式操作 该方式是当细胞和培养基一起加入反应器后，在细胞增长和产物形成过程中，不断地将部分条件培养基取出，同时不断地补充新鲜培养基。它与连续式操作不同之处在于取出部分条件培养基时，绝大部分细胞仍保留在反应器内，而连续式培养则同时也取出了部分细胞。该操作方式是近代用动物细胞培养生产各种药品最被推崇的方式。它的优点是：①细胞可处在较稳定的良好的环境中，有害代谢物浓度低；②可极大地提高细胞密度，从而极大地提高了产品产量；③产品在罐内停留时间缩短，可及时收留在低温下保存，有利于产品质量的提高；④培养基的比消耗率较短，加之产量质量的提高，生产成本明显降低。 二、动物细胞培养的操作方式 灌流式操作在某些生物反应器中是唯一可行的操作方式，如中空纤维生物反应器、固定床或流化床式反应器、膜式生物反应器等。在这些反应器中，细胞已被固定，在取出部分条件培养基和补充新鲜培养基和补充新鲜培养基时，细胞基本上都被保留反应器中，故采用该操作不存在困难。但在微载体培养、悬浮培养和结团培养中，就存在一个如何使条件培养基和细胞、载体分离的问题。为了解决该问题，目前采用的方法有与旋转轴连在一起的滤网、有专门用于悬浮细胞的中空纤维分离器、超声波分离器和靠微载体自重沉降分离的上细下粗的排液柱以及靠离心分离的专用离心机等。 二、植物细胞制药 概述 高等植物次级代谢产物极其丰富多样，除药用之外，许多次级代谢产物还是食品、化工和农业化学的重要原料。 人们通过研究，一方面通过化学合成的方法来生产，另一方面通过植物细胞培养方法来生产。目前已经研究过的近300种植物细胞培养物可以生产400多种人们感兴趣的成分。 基本概念 1、植物组织和细胞培养 植物组织和细胞培养是指在无菌和人工控制的营养（培养基）及环境条件（光照、温度等）下，研究植物的细胞、组织和器官以及控制其生长发育的技术。 1、植物组织和细胞培养 植物无菌培养技术分如下几类：①幼苗及较大植株的培养，即为植物培养（plant culture）；②从植物各种器官的外植体增殖而形成的愈伤组织的培养叫做“愈伤组织培养”（callus culture）；③能够保持较好分散性的离体细胞或较小细胞团的液体培养，称为“悬浮培养”（suspension culture）；④离体器官的培养，如茎尖、根尖、叶片、花器官各部分原基或未成熟的花器官各部分以及未成熟果实的培养，称为“器官培养”（organ culture）；⑤未成熟或成熟的胚胎的离体培养，则称为“胚胎培养”（embryo culture）。 第七章 细胞工程制药 一、 动物细胞制药 概述 （1）发现细胞和细胞学说创立。1665年英国物理学家Hooke通过自制的显微镜观察切成薄片的软木时看到死细胞的细胞壁。 （2）组织培养或细胞培养。1885年德国生理盐水培养鸡胚组织，至1907年，细胞体外培养宣布进入一个新时代。 （3）细胞工程学时代。对细胞进行人工改造及培养以使其为人类服务的时代，包括真核细胞的基因重组、导入、扩增和表达的理论和技术，细胞融合的理论和技术，细胞器特别是细胞核移植的理论和技术，染色体改造的理论和技术，转基因动、植物的理论和技术，细胞大量培养的理论和技术，以及产物分离纯化的理论和技术。 （4）细胞工程制药成为现代制药技术中常用的手段。 动物细胞的形态和特点 一、动物细胞的形态 二、动物细胞的生理特点 一、动物细胞的形态 细胞的分化（或特化） 形态分化在离体培养同样也存在。 离体培养的细胞分为两类： 贴壁依赖型（anchorage-dependent）和非贴壁依赖型（anchorage-independent），前者可简称为贴壁细胞，后者可简称为悬浮细胞。 动物细胞结构图 一、动物细胞的形态 1、贴壁细胞 这类细胞的生长必须有给以贴附的支持物表面，细胞依靠自身分泌的或培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长、增殖。细胞在该表面生长一般形成两种形态，即成纤维样细胞型或上皮样细胞型。前者主要来源于中胚层组织的细胞，生长时呈放射状、旋涡状或火焰状走行；后者主要来源于外胚层和内胚层组织的细胞，生长时彼此紧密连接成单层细胞片。 一、动物细胞的形态 2、悬浮细胞 这类细胞的生长不依赖支持物表面，可在培养液中呈悬浮状态生长，如血液的淋巴细胞和用以生产干