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作者签名(手写): 导师签名。手写,:乏角t继
基于异鼠李素为杂交指示剂的电化学
基于异鼠李素为杂交指示剂的电化学 DNA生物传感器的研究
中文摘要
DNA电化学生物传感器是近几年迅速发展起来的一种全新的生物传感器, 它是进行核酸结构分析和检测的重要手段之一,其特点是测定快速、简便、灵敏、 价廉。
DNA电化学生物传感器研制的关键技术之一是高灵敏度杂交指示剂的筛 选。本论文以电化学和紫外.可见光谱方法为主要研究手段,对具有抗癌、抗菌 活性的黄酮类化合物异鼠李素电化学性质及与鲑鱼精DNA的相互作用机理进行 了研究,筛选出异鼠李素作为高灵敏度、高特异性的杂交指示剂,用于检测急性 早幼粒细胞白血病PML.RAR0t融合基因。
实验结果表明,黄酮类小分子异鼠李素在优化的条件下以嵌插方式结合到 dsDNA双螺旋碱基对中。由电化学研究结果可以看出,异鼠李素与dsDNA之间 形成了一种非电活性的超分子化合物而导致峰电流减小。紫外.可见光谱显示 dsDNA的加入导致最大吸收峰减色并伴有红移,此现象证实异鼠李素与鲑鱼精 dsDNA发生嵌插结合。由电化学动力学参数结合率和结合常数的测定可知,异 鼠李素与DNA形成2:l复合物,结合常数为1.03×105L/mol。
以异鼠李素为杂交指示剂,选用共价键合法制备了DNA电化学传感器,该
传感器具有高特异性、高灵敏度、较低检测限。当互补链DNA浓度在2.0x 108—
1.2x10。7mol/L范围内,峰电流与其浓度呈良好的线性关系,线性回归方程为Ip
(衅)=O.2378 C(州)+2.269,相关系数r=0.9973,检出限为1.5x10。9 mol/L (S/N=3)。
本文首次研制的基于异鼠李素为新型杂交指示剂的电化学生物传感器用于 检测急性早幼粒细胞白血病PML.RARGt融合基因,获得了令人满意的结果。
关键词:异鼠李素相互作用杂交指示剂DNA电化学生物传感器急性早幼粒 细胞白血病
2
Studies
Studies of Electrochemical DNA Biosensor using the
璐0rnamnetin as IIyDrld屹anon lndlCator
Abstract
DNA electrochemical scn∞r is noted widely in recent years for rapid development,which is one of the important detective and analytic me,ms of nucleic acid、)I,ith advantage of rapid,simple,sensitive and low cost.
One of the keys to a successful electrochemical biosensor is to select a sensitive
hybridization indicator.This article studied the electrochemical properties of flavonoids derivatives————isorhamnetjn OsoR) which iS of anticancer and antibacteria activation,and the interaction mechanism botwecn salmon sperm DNA and ISOR,through electrochemical and UV/vis spectroscopic techniques,and ISOR as a sensitive and specific hybridization indicator for detection of PML—RARgg fusion
gene in a
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