应用於癌症治疗之磁性壳.doc

PAGE \* MERGEFORMAT 1 固態發酵培養基組成對於樟芝菌絲體活性成份生成之影響 研究生：王皓緯 指導老師：楊芳鏘、 摘要--近年來人們對於健康概念的提升促使天然物製成的保健藥品與食物倍受重視和研究。真菌發酵產物與其子實體的生理活性成分更被受重視，其中台灣獨有的真菌-樟芝（Antrodia cinnamomea）的療效更在世界醫療體系和學術研究單位投下驚人的震撼彈。但受限於培養與耗費時間過長，往往將實際用於治療藥物化的夢想粉碎。本實驗試用添加物去刺激樟芝菌絲體產生二代謝產物含量。發現在添加金桔粉末在添加 2g/瓶 時有最高粗三萜含量32.55 mg/g sub.。將金桔果皮經過水淬取後做培養後觀察結果，得知樟芝水淬與殘渣都可以在第28天提升葡萄糖胺含量。但是兩種淬取培養的粗三萜含量約為25 mg/g sub.都高於控制組的18.03 mg/g sub.，因此為了證實添加物添加發酵培養的可能性，選取了本身萜類較少而總多酚和總類黃酮含量與柑橘果皮相同的葡萄與蘋果果皮做添加，發現葡萄果皮在第28天葡萄糖胺含量與粗三萜類含量皆高於控制組而達到3.84 mg/g sub.與28.07 mg/g sub.，實驗結果皆證實天然物添加對於樟芝菌絲體提高代謝產物是有十分明顯的影響。 關鍵字：樟芝、蕎麥、果皮、三萜 一、緒論 1-1 前言 近年人們對健康有著相當療效的天然食藥用菇之保健類食品更加的受到注意。其中樟芝在民間盛傳樟芝的功效頗多，多數和保護肝臟、提神、清涼解毒、抗腫瘤、體防疫(免疫增強)、抗氧化及抑制腫瘤細胞增生等多種生理功能。但樟芝對宿主具有專一性，只生長在台灣本土特有牛樟樹(Cinnamomum kanehirae) 老舊腐壞牛樟樹幹涵洞內壁，不易為人所採收，故民間視若珍寶，為台灣市場目前價格最昂貴的野生真菌。因此有效的開發與改善樟芝菌絲體的培養成為所有研究的重要課題。 1-2 研究動機 本研究以非主流食用穀物-蕎麥作為樟芝固態發酵之培養基質，目的以提高發酵產物的生理活性成分。培養後收集固態發酵物。期望取代傳統培養法，使用昂貴的國寶牛樟木做為基質，並改善長期培養的缺點，期望增進樟芝藥用價值及提供一個保健醫療上的新方向。 二、文獻回顧 2-1 樟芝生理活性成分 樟芝有許多的生理活性成份，其中的三萜類化合物（triterpenoids）、多醣體、微量元素（如鈣、磷、鍺）、核酸、凝集素、氨基酸、固醇類、血壓穩定物質（如antrodia acid）與生物鹼等成份，都在近數十年來被研究證實（Song and Yen,2002;王伯徹等人，2002；朱建儒，2003）。 2-2三萜類（triterpenoids） 萜類(Terpene)化合物是由碳氫化合物或脂質代謝而產生，以異戊二烯為單體之化合物，分子組成通式(C5H8)n。普遍存在於植物界的一類化合物，在動物界為數甚少，萜類的主要分類法是根據分子中包含異戊二烯單體數目分類，將含有兩個異戊二烯叫做單萜(monoterpene)；含有三個異戊二烯單體叫做倍半萜(sesquiterpene)；含有四個異戊二烯單體叫做雙萜(dieterpene)；含有五個異戊二烯單體叫做二倍半萜(sesterpene)；而含有六個異戊二烯單體則叫做三萜(triterpene)(肖崇厚, 1989)。 2-3蕎麥 蕎麥在世界各國均屬非重要糧食作物(minor crop)，主要栽培地區為歐亞溫帶地區。近年來，利用天然食品作為機能性或保健食品在歐美先進國家已蔚為風潮，其中一種品種韃靼種蕎麥，因具有苦味，故被稱之為「苦蕎麥」。比普通種蕎麥高出37.7%、10.7%及26.8%，澱粉含量較普通種蕎麥減少7.1%，且芸香苷及檞皮素含量比普通種蕎麥高出8.3倍及7.2倍(曾勝雄，2004)。 2-4固態發酵 固態發酵是微生物培養的一種方式，使用固態物質當作基質，讓微生物生長在上面。與液態深層發酵相比，使用固態發酵培養，微生物有時能有良好的生長情形，也可產生較大量的胞外酵素，或其他代謝產物。雖然一些傳統食物與酒精飲料早已經應用在工業化生產，但近年來固態發酵的應用已經被擴展到製藥工業與生化產業上(陳書豪，2006) 。 三、材料與方法 3-1 實驗菌株與細胞 本實驗所採用的樟芝菌株Antrodia cinnamomea (BCRC 35396)購自食品工業發展研究所生物資源中心。 3-2 實驗架構 圖3-1 實驗架構 3-3 三角瓶固態培養試驗 本實驗使用四種天然穀物蕎麥作為基質，在250 ml三角瓶內分別加入28g的蕎麥當作固態培養基，再添加1g 添加物，並控制其水份含量為45%。 將基礎培養基培養14天後的種菌，以滅過菌的均質機(polytron)攪碎菌絲球，並以 10