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电子科技大学实验中学高2017届生物一轮复习 第 PAGE 14 页 微生物的培养与利用 一、直面高考，了解考试方向 （一）历年考查分值、题型及考查角度分析 考题 分值 考查角度 2016年全国I，39 15分 培养基的营养构成，实验操作、数据分析与方案评价 2016年全国III，39 15分 稀释涂布平板法的原理，微生物的筛选和菌种保藏 2015年全国I，39 15分 培养基的营养构成，微生物数量的测定 2014年全国I，39 15分 培养基的分类及相应功能，分解纤维素的微生物的分离 2014年全国II，39 15分 对照实验的设计，平板划线法和稀释涂布平板法的原理、过程与注意事项，实验方案分析与评价 2013年全国II，39 15分 平板划线法和稀释涂布平板法的特点，实验方案分析与评价 （二）考纲解读 考点 考纲要求 考查角度 ⑴微生物的分离和培养 实验与探究能力 培养基(分类与营养构成) 无菌技术(实际情景中的消毒或灭菌措施) 实验操作(培养基制备，重点考查平板划线法和稀释涂布平板法两种接种方法的原理、过程和注意事项) 菌种保藏(两种方法的异同) ⑵某种微生物数量的测定 重点考查稀释涂布平板法测定活菌的原理、操作和计算 ⑶培养基对微生物的选择作用 选择培养的原理 对照实验的设计 菌种的鉴定 感悟高考，夯实基础知识 考点1 培养基 例1.（2012全国卷·改编）关于细菌的叙述中，正确的是（ ） 不同种类细菌的生长均需要相同碳源 B.常用液体培养基分离获得细菌单菌落 C.琼脂是一种多糖，可为培养的细菌提供能量 D.培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选 【题后悟道】——培养基的分类和营养构成 变式训练1．请据某微生物培养基的配方表回答下列问题 编号 ① ② ③ ④ ⑤ 成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O 含量 0.4 g 4.0 g 0.5 g 0.5 g 100 mL (1)此培养基按物理性质划分属于 培养基，原因是 。 (2)此培养基按功能划分属于 培养基，能在其上生长的是 微生物。 (3)若在培养基中加入氨基酸，则它可充当的营养成分包括 和生长因子。 (4)若要观察微生物的菌落特征，培养基中应添加的成分是 。 考点2 无菌技术 例2．（2015江苏·改编）做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（ ） A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖 B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 D．为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该用牛皮纸(报纸)包扎器皿 【题后悟道】——无菌技术的主要内容 考点3 细菌的纯化与分离 例3．（2014全国卷 = 2 \* ROMAN \* MERGEFORMAT II·改编）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题： 为保证培养效果，该小组在培养细菌前测定了河水pH，结果为pH=4.3。因此在配制培养基时，必须在_______前将pH调至对应值。 接种细菌前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 。培养过程中，平板需______放置。 该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过 灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是_____________________ __________________________________________________________。 （4）示意图A和B中， 表示的方法可用于细菌计数。 （5）该小组欲将分离得到的菌种报送环保机构，则应在菌种保存时______（选填“添加”，“不添加”）甘油。 【题后悟道】——比较平板划线法和稀释涂布平板法 平板划线法 稀释涂布平板法 稀释原理 一系列梯度稀释 注意事项 (1)操作第一步、 前及 后都需要灼烧接种环； (2)灼烧接种环，待其 后才能伸入菌液； (3)划线时 不要与第一区相连； (4)划线用力大小要适当，防止 。 若取菌液2mL，则应将其加入 中，以获得10倍稀释液。 相同点 (1)都通过一定的稀释操作获得 菌落，从而起到 作用。(2)