体外免疫原快速激活全血细胞固有免疫反应系统-中国医药生物技术.PDFVIP

64 中国医药生物技术 2010 年 2 月第 5 卷第 1 期 Chin Med Biotechnol, February 2010, Vol. 5, No. 1 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.01.015 ·技术与方法· 体外免疫原快速激活全血细胞固有 免疫反应系统模式的应用 郭峰，钱宝华，花美仙 血液循环的血液固有免疫系统由血浆补体固有免疫子 1.2.3 S180 癌细胞激活全血细胞与白细胞固有免疫反 系统、红细胞固有免疫子系统、血小板固有免疫子系统和白 应 每个待测新鲜标本（静脉采血后 2 h 之内）都设立免 细胞固有免疫子系统构成[1] 。若采用系统生物学的复杂理论 疫原激活全血组（自然实验组）、生理盐水全血对照组（自 和数学公式计算探讨这些子系统之间的网络关系，则必须通 然对照组）、免疫原激活白细胞组（分离实验组）和生理盐 过在体外建立系统模式进行系统免疫学实验研究[2] 。根据研 水白细胞对照组（分离对照组），血细胞免疫活性采用异种 究目的不同，设计不同的系统模式，我们已建立了相关体外 肿瘤细胞抗原，免疫原性极强的灭活小鼠的艾氏腹水癌细胞 系统模式[3-4] ，并朝着计算免疫学方向发展，在卡介苗治疗 悬液（S180 株，浓度 5 × 106 个/ml ）按表 1 及下述方法 肿瘤的免疫以及中药多糖等生物免疫调节剂作用机制研究 快速激活血细胞的固有免疫活性。 等[5]多方面有所应用，我们在红细胞固有免疫活性研究的基 具体设计见表 1 。 础上，逐步发展与形成系统血液固有免疫学的新概念，发现 所有血细胞都具有固有免疫活性，可在体外用免疫原激活系 表 1 免疫原 S180 癌细胞激活全血细胞 统血液固有免疫反应，体外系统实验免疫模式的建立，为系 和白细胞成分配表 统免疫学提供了崭新的研究方法，为寻找炎症免疫反应中关 组别 S180 全血细胞 白细胞 血浆 生理 悬液 悬液 悬液 （ml ） 盐水 键免疫分子带来了新的希望。下面为有关系统血液免疫反应 （ml ） （ml ） （ml ） （ml ） 网络关系的初步应用实验。 免疫原激活全血组 0.2 0.2 － 0.3 － 生理盐水全血对照组 － 0.2 － 0.3 0.2 1 材料与方法 免疫原激活白细胞组 0.2 － 0.2 0.3 － 1.1 主要试剂和仪器 生理盐水白细胞对照组 － － 0.2 0.3 0.2 枸橼酸抗凝新鲜血来自长海医院血站 10 例青壮年 注：“－”未加 献血人员；IL-6 、IL-10 、IL-12 免疫酶联试剂盒购于上海 按表 1 分配的 4 组，分别混匀后，置于 37 ℃ 水浴箱 茂元公司；C4 抗血清购于美国 DADE Behring 公司；鼠 温育 1 h ，2500 r/min ，离心半径 20 cm ，离心 5 min 后， 抗人 CD35-单抗购于丹麦 DAKO