凝血酶滴定法测定宽体金线蛭抗凝血活性的影响因素-中国药师.PDFVIP

中国药师　　２０１４年第１７卷第５期　　ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｉｓｔ２０１４，Ｖｏｌ．１７　Ｎｏ．５ ·中药资源与鉴定专栏 · 凝血酶滴定法测定宽体金线蛭抗凝血活性的影响因素 １ １ １ ２ １ 刘义梅 　喻珊 　崔瑞勤　陈艳明　陈科力 　 （１．教育部中药资源与中药复方重点实验室＆湖北中医药大学药学 院　武汉４３００６５；２．牡丹江友博药业） 摘　要　目的：对测定宽体金线蛭抗凝血活性的凝血酶滴定方法的影响因素进行分析。方法：用白瓷点滴板代替试管进行 滴定反应（简称白瓷板法），考察白瓷板法和常规的试管法、不同凝血酶滴定间隔时间和凝血酶浓度对抗凝血活性测定的影 响。结果：在同样条件下，白瓷板法测定抗凝血活性的精确度和稳定性较试管法高。用白瓷板法测定，宽体金线蛭样品浓度 －１ －１ －１ 在一定范围内（０．１２５～０．３３３ｇ·ｍｌ ）、凝血酶浓度为２０ｕ·ｍｌ或１０ｕ·ｍｌ 时，每隔１ｍｉｎ滴加１次，每次５ ｌ，样品浓度 μ 与消耗的凝血酶体积呈线性相关，ｒ值分别为０．９６１和０．９９２；所测得样品的抗凝血活性分别为（３３．０８±２．６４）和（３１．２４± －１ －１ １．３２）ｕ·ｇ ，ＲＳＤ分别为８．０％和４．２％；对于０．３３３ｇ·ｍｌ 的样品，其测量产生的理论误差不大于１０％和５％。结论：白瓷 －１ 板法可用于测定宽体金线蛭样品的抗凝血活性，用１０ｕ·ｍｌ 的凝血酶溶液，每分钟滴加一次，每次５ ｌ进行测定，其线性和 μ 精确度均较好。 关键词　宽体金线蛭；抗凝血活性；凝血酶滴定法；滴定间隔时间；凝血酶浓度 中图分类号：Ｒ９１７　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００８０４９Ｘ（２０１４）０５０７８９０５ ＩｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇＦａｃｔｏｒｓｉｎＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＡｎｔｉｃｏａｇｕｌａｎｔＡｃｔｉｖｉｔｙｏｆＷｈｉｔｍａｎｉａＰｉｇｒａＷｈｉｔｍａｎｂｙＴｈｒｏｍｂｉｎ Ｔｉｔｒａｔｉｏｎ １ １ １ ２ １ ＬｉｕＹｉｍｅｉ，ＹｕＳｈａｎ，ＣｕｉＲｕｉｑｉｎ，ＣｈｅｎＹａｎｍｉｎｇ，ＣｈｅｎＫｅｌｉ（１．ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅＲｅｓｏｕｒｃｅａｎｄＣｏｍｐｏｕｎｄ Ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ，ＥｄｕｃａｔｉｏｎａｌＭｉｎｉｓｔｒｙ＆ＨｕｂｅｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｗｕｈａｎ４３００６５，Ｃｈｉｎａ；２．ＭｕｄａｎｊｉａｎｇＹｏｕｂｏＰｈａｒｍａｃｅｕ ｔｉｃａｌＣｏｍｐａｎｙ） ＡＢＳＴＲＡＣＴ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇｆａｃｔｏｒｓｉｎｔｈｒｏｍｂｉｎｔｉｔｒａｔｉｏｎｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙｏｆ ＷｈｉｔｍａｎｉａＰｉｇｒａＷｈｉｔｍａｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅｗｈｉｔｅｐｏｒｃｅｌａｉｎｐｌａｔｅｓｗｅｒｅｕｓｅｄａｓｔｈｅｔｉｔｒａｔｉｏｎｃａｒｒｉｅｒｓｉｎｓｔｅａｄｏｆｔｕｂｅｓｉｎｔｈｅｔｉｔｒａｔｉｏｎ （ｃａｌｌｅｄｗｈｉｔｅｐｏｒｃｅｌａｉｎｍｅｔｈｏｄｆｏｒｓｈｏｒｔ）．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃａｒｒｉｅｒｓ，ｉｎｔｅｒｖａｌｔｉｍｅｏｆｔｉｔｒａｔｉｏｎａｎｄｔｈｒｏｍｂｉｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｎｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓｏｆａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙｔｅｓｔｗａｓｓｔｕｄｉｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｕｎｄｅｒｔｈｅｓａｍｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓｍｏｒｅａｃｃ