基于微流芯片技术的电化学测菌法在快速定量检测变形链球菌中的应用分析-口腔临床医学专业论文.docxVIP

安徽医科大学硕士学位论文 安徽医科大学硕士学位论文 PAGE PAGE 10 1.1 试剂和仪器 30 1.2 ITO 叉指电极微流芯片制作过程 31 1.3 变形链球菌样本的预备 32 1.4 变形链球菌的检测 33 1.5 数据处理 33 2 结 果 33 2.1 ITO 叉指电极微流芯片电化学测菌法检测变形链球菌 33 2.2 测量时间对系统电阻抗测量的影响 35 2.3 进样速度对系统电阻抗测量的影响 40 3 讨 论 41 4 结 论 43 全文总结 44 参考文献 45 附录 52 致谢 56 综述及参考文献 58 基于微流芯片技术的电化学测菌法在快速定量检测变形链 球菌中的应用研究 中文摘要 变形链球菌是人类口腔中的主要致龋菌，通过对变形链球菌的数量的检测能够评价 个体龋病的活跃性、预测机体患龋风险，从而为龋病的监测和预防提供重要的参考依据。 微流芯片技术可以使整个生化反应过程集中在一块微米尺度的芯片上完成，由于具有快 速、敏感、低成本和自动化分析等特点，已经发展成为多学科交叉研究的热门方向之一。 课题组前期利用基于液体电极微流芯片的电化学测菌法进行了慢性牙周炎主要致 病菌—牙龈卟啉单胞菌的快速定量检测，但是这一方法是否适用于变形链球菌的检测尚 不清楚。本研究将电化学测菌法引入该领域，实验一以液体电极微流芯片为平台，完成 了变形链球菌的定量检测并与细菌培养法的结果进行比较，验证了该方法的精确性和适 用性。 目前在微流控芯片检测中应用最广泛的主要是金属电极，包括金电极、铂电极和铜 电极，镍电极、铝电极、ITO 电极等。金和铂由于具有稳定的化学特性、易于加工、噪 声小等优点，应用最为广泛，但是价格较昂贵[1]。ITO（In O :SnO =9:1）膜具有高电导 2 3 2 率、高可见光透过率、 高红外光反射率、与玻璃基底结合牢固、抗擦伤等众多优良的 物理性能,以及良好的化学稳定性和一些其他的半导体特性，容易制备成电极图形，经 济性适用性强[2，3]。实验二以 ITO 固体金属电极微流芯片为反应平台，定量检测变形链 球菌，再一次验证了电化学测菌法的准确性和适用性。 本研究的结果表明：基于微流芯片技术的电化学测菌法可检测出 104-109cells/ml 浓度的变形链球菌；实验获得可检测的稳定数值的时间为 10 分钟左右；该方法与细菌 培养法相比具有高度相关性。 本研究首次将基于微流芯片技术的电化学测菌法应用到变形链球菌的定量检测领 域，不仅为该领域的研究者提供了新的思路，而且使电化学测菌法的应用范围得到一定 扩展，从而为该方法在口腔细菌检测领域中的进一步应用提供了有力的参考依据。 关键词：微流芯片技术 电化学测菌法 变形链球菌 液体电极 ITO 固体金属电极 Based on Microfluidic Chip Technology with Electrochemical Method in the Rapid Quantitative Determination of Applied Research for Streptococcus mutans Abstract Streptococcus mutans is a cariogenic bacteria in the human oral cavity,by detecting the number of t hem we can evaluate people’s caries activity and predicting risk of individuals dental caries. Thus it is able to provide an important reference for the monitoring and prevention of dental caries. Microfluidic chip technology allows the entire biochemical reaction is concentrated in a micron-scale chip. Due to it’s characteristics of rapid, sensitive , low cost and automated analysis, has developed into one of the popular directions of multidisciplinary research. The issue group had used fluidic electrode microfluidic chip based on electrochemical method for ra