根癌农杆菌介导的水稻快速转化方法研究.pdfVIP

维普资讯 中国蓐孝c互擅 第 24卷 第 5期 2008年 5月 http：llwww．easb．org．cn ·83 · 根癌农杆菌介导的水稻快速转化方法研究 苏 益 ，黄善金 ，蔺万煌 ，萧浪涛 (湖南农业大学植物激素重点实验室，长沙410128；中国科学院植物研究所，北京 100093) 摘 要：为了适合于中花 ll的转化，笔者在愈伤组织预培养时间、浸染时间和凝固剂等方面改进 了一种 针对 日本睛的水稻快速转化方法。将消毒后的中花 l1成熟种子在含有 2．0m~／L2,4．D的培养基 中培养 8d，不用继代愈伤组织，用含有 GFP报告基因的根癌农杆菌直接浸染诱导的愈伤组织，经3d共培养和 14d的筛选培养后，直接用新生的愈伤组织进行再分化，最终在40d内就获得 了水稻转基因植株 。转化效 率和再生效率分别达到 了71．3％和 57％。从而证 明了利用农杆菌直接浸染水稻早期愈伤的快速转化是 切 实可行的。 关键字：中花 ll；农杆菌；快速转化；转化效率；再生效率 中图分类号：S5l1．2+2 文献识别码 ：A StudyofRiceHigh-speedTransformationbyAgrobacterium Infecting SuYi，HuangShanjin。，LinWanhuang，XiaoLangtao ． (啊u，啪 AgriculturalUne~ HunanProvincialKeyLaboratoryofPhytohormone，Changsha410128； 2InstituteofBotany,theChineseAcademyofSciences，Beijing100093) Abstract：FormakingitadapttoZhonghual1transformation，researchersimproveahigh-speedtransfomr a- tionmethodadaptingtothejaponicaricecultivar N‘ipponbare’onseedspre-cuhure，timeofinfectionand choosingge1．ThesterilizedseedsofZhonghual1werepre-culturedonmediumwith,2．0mg／L2,4-D，andthe 8daysoldcalliwereimmediatelyinfectedbyAgrobacterium containingGFP．ABD2butnotundergosubcul- ture．After3daysco-cultureand 14daysselection，Proliferatingcalliweredirectlydifferentiatedonregen— erationmedium．Successfully，thetransgenicplantletswereharvestedwithin40days．Furthemr ore，thetIlans— fomr ationratioandtheregenerationratiowererespectively71．3％ nad57％．I