课件：黄连中小檗碱的研究仪器分析.ppt

黄连中小檗碱的研究 黄连，中药材具有清热燥湿，泻火解毒的功效，可用于湿热内蕴所致黄疸，呕吐，泻痢，温病高热，目赤，牙痛，心烦不寐， 心火亢盛，心悸不宁，消渴；外治湿疮，湿疹，耳道流脓，疮疡。姜黄连清胃，止呕，于寒热互结，湿热中阻，痞满呕吐时施用； 黄连的有效成分主要为生物碱，其中小檗碱的含量最高。小檗碱为一种异喹啉生物碱，又称黄连素，熔点145℃。小檗碱对溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌、淋球菌和弗氏、志贺氏痢疾杆菌均有抗菌作用，并有增强白血球吞噬作用。因此，快速准确地测定黄连中小檗碱含量，对于中草药有效成分的分析研究有着重要意义。 Company Logo 黄连中小檗碱的检测 红外光谱研究 高效液相色谱研究 两种分析方法的比较 原理：黄连所含化学成分不同，其红外光谱的特征吸收峰的位置、峰形、峰强也就不同。 D B C A 实验仪器 样品处理 实验步骤 数据处理 红外光谱研究 （定性） 实验仪器： 采用Spectrum Gx型的傅里叶变换的红外分析光谱，检测器为DTGS的检测扫描器，红外光谱范围为4000—400 样品处理： 黄连药材经粉碎后过40目筛，分别称取适量黄连药材粉末两份，各置于250 mI圆底烧瓶中，分别加入8倍量去离子水或80％乙醇水溶液浸润30min，之后加热回流提取2次，每次l h，趁热过滤，将滤液浓缩后真空干燥，得到黄连的水提物与醇提物。 实验步骤： 分别取上述药材、水提取物、醇提物及化学对照品盐酸小檗碱粉末少量，与KBr混合，研磨均匀后压片，放入光谱仪中测定。 数据处理： 图1为黄连药材及其水提取物、80％乙醇提取物和主要成分盐酸小檗碱的红外光谱图 表1为盐酸小聚碱的红外谱峰归属情况。 比较图1各谱图的吸收峰可知，盐酸小檗碱1505 芳环骨架振动峰在整体谱图中表现的峰越强，峰形越细长，则该混合物中的盐酸小檗碱的含量越高。除此之外，各谱图中1365，l277，l229，l036 的存在也可以帮助判断小檗碱在混合物中含量的高低；另外，通过判断谱峰之间的比例也能帮助辨别盐酸小檗碱在混和物中的比例。 原理：乙腈-0.1%磷酸为流动相进行分离以高效液相色谱仪进行检测，利用峰高进行定量分析。? D B C A 实验仪器 色谱条件 供试品制备 数据处理 高效液相色谱 （定量） 实验仪器： Agilent1200高效液相色谱仪 色谱条件： 色谱柱为Luna C18柱（150mm×4.60mm,5μm） 流动相为乙腈-0.1%磷酸（25∶75） 流速为1ml· 检测波长为340nm 柱温为25℃ 进样量10μl 每1000ml0.1%的磷酸溶液加入50μl的三乙胺（扫尾剂）进行洗脱 供试品的制备： 酸性水溶剂煎煮法提取黄连中的盐酸小檗碱，再利用热蒸馏水溶解，抽滤，重结晶，最后用无水乙醇溶解，抽滤，重结晶，的盐酸小檗碱精制品。取精制样品适量，研细，精密称取6.3mg，置容量瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30min，放冷，过滤，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，即得。 标准曲线： 精密称取盐酸小檗碱对照品12.30mg，置50ml量瓶中，加入甲醇，超声15min溶解，并稀释至刻度。对照品贮备液设进样量为1、2、3、5、7、10μl,依次注入色谱仪，测定峰面积，以盐酸小檗碱对照品含量（X）为横坐标，以峰面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线。进行线性回归，得回归方程。盐酸小檗碱回归方程及线性系数见图1.盐酸小檗碱含量在0.246~2.460μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系。 阴性试验： 制备盐酸小檗碱阴性试液，依所给色谱条件操作，得色谱图，与对照品、供试品色谱图比较，结果见图2。表明在、盐酸小檗碱峰处无干扰。 Company Logo IR定性分析 能够简单快速地提供黄连中主要化学成分的定性与半定量信息。 IR和HPLC 的 比较 HPLC定量分析 简单可行，重复性好，可作为检测盐酸小檗碱含量的质量控制。 后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 资料仅供参考，实际情况实际分析 * * * *