MSD (Meso Scale Discovery) 与传统ELISA kit优势比较.pdfVIP

MSD 将 ELISA 线性范围提高2-3 个数量级，灵敏度提高10-100 倍 Percepta 在针对550 位北美和欧洲的顶级生物医药研究人员的报告中显 示，基于电化学发光技术的MSD ( Meso Scale Discovery ) 是最受欢迎 的5 大免疫分析品牌之一。 MSD (Meso Scale Discovery) 与传统ELISA kit 优势对比如下: 1.更高灵敏度与更宽的线性范围： MSD 灵敏度可达0.05pg/ml，有效线性范围达6log。 传统 ELISA 常规线性范围在 10pg/ml-1000pg/ml，采用Ultra-sensitivity 试剂盒则为 0.5-10pg/ml。 对于一个生物学实验，往往要兼顾正常对照组与疾病组的样本，样本中 的待测蛋白浓度分布一般从零点几个pg 到几千pg 不等，所以一个ELISA 试剂盒的线 性范围不能同时兼顾高低丰度蛋白的检测，需要非常多的预实验进行稀释度摸索，费时 费力。而MSD 提供了从亚皮克级到几万皮克浓度的宽线性范围，有效将所有样本落在 最佳线性范围内，得到准确测定（见下图比对，红色条状为疾病样本，黄色条状为正常 参照组）。 同时MSD 的灵敏度可达 0.05pg/ml，对于目前有些疾病样本中待测蛋白浓 度下调的研究项目来说，更能够有效的发现疾病组与正常对照组的差异，实现新的科学 发现。 2.节省样本用量，可实现多重检测。 传统ELISA 所需样本量一般为50-100ul，如果 同时关注10 个细胞因子的表达调控则可能需要多 达500-1000ul 的样本，对于很多ELISA 实验来说 样本量就成了关键问题。 MSD 通过点阵技术，在96 孔石墨电极板里可 实现10 个指标每孔的检测。也可在24 孔板里 定制实现100 指标/孔的筛选检测。满足了不同 的实验需求。在样本用量上，无论单指标或多 指标都只需≤25ul 的样本，即可完成检测。为 珍稀样本的研究提供了更多的数据。 目前MSD 可以在100ul 的极其珍贵的脑脊液样 本中，复孔定量测定40 种Biomarker，这是以往 技术都所不能实现的。 3. 均一性、重复性高： MSD 板内CV6-8%,板间10%,批间15%。同时MSD 试剂盒有效期长达30 个月，为 长时间研究项目，提供了使用同一批号试剂的可能性。 4. 样本兼容度高，基质效应小： MSD 平台由于其独特的电化学发光原理，可将许多非特异信号予以排除，所以受样本性 质的影响就更小（如粘稠样本，悬浊颗粒样本等），因此对于各类生物学样本的兼容度更高。 目前MSD 平台上测定样本总类主要包括：血清，血浆，培养上清，细胞/组织裂解液， 脑脊液，尿液，关节滑液，唾液，痰液，粪便提取液，眼睛房水，各类灌洗液等基本所有的 生物学样本。对于最简单的血浆样本来说，MSD 也可兼容不同抗凝剂的血浆样本。大大降 低了实验所需样本收集上的难度。 此外基质效应会影响到实验准确性与灵敏度，MSD 是目前唯一一个被国外科学家广泛认 可的基本无基质效应的免疫分析平台。 请参见: Immunol Res;DOI 10.1007/s12026-014-8491-6; T.Maecker 5. 实验流程简便、快速、多元化 MSD 提供了比ELISA 更为便捷快速的实验流程，将加样等手动操作时间缩短至45 分钟 以内，并为培养上清等高丰度样本快速检测，提供了只需2.5 小时的一步法流程，解放了劳 动力，提高了科研效率。同时在MSD 平台上由于特有的电化学发光技术，可有效控制背景 信号，可以实现免洗的实验流程。请见下图MSD 流程以及实验时间比较： 一步法流程： 超敏实验流程： 实验流程时间比对： 6. 信号稳定且不受显色顺序影响 ELISA 在显色时，需要避光来保证信号稳定。同时，由于底物与终止液加入有先后时间 差异，会不可避免的产生因显色时间不一致导致的数据差异。 MSD 由于基于电化学发光技术，信号分子 SULFO-TAG 需在电激发的情况下才能产生 信号，因此整个实验流程无需避光，不受实验操作人员技术水平差异的影响。此外，在实验 完成加入所有液体后，并不会被激发出任何信号。只有送入仪器，通过电极电激发后方才产 生信号，每孔激发与信号采集时长统一，避免了像ELISA 底物与终止液加入顺序先后所导 致的数据差异，数据稳定度极高。 请见下图电化学发光平台示意图：