HIV实验室诊断课件.ppt

HIV Ab/Ag特点 HIV-Ab与HIV-Ag双检测系统 —HIV-Ag和HIV P24抗体共同包被 —HRP标记HIV-Ag和HRP标记亲和素共同组成酶标试剂 双抗原夹心法测HIV-Ab ——包被抗原+HRP标记抗原 双抗体夹心LAB法测HIV-Ag ——包被抗体＋生物素标记抗体＋HRP标记亲和素 生物素-亲和素反应系统应用 50份标本混合 ?阳性 每10份标本再检测 ?阳性 每一份标本再检测 集合HIV核酸检测用于血液筛查 集合 HIV RNA 检测方法用于在HIV抗体阴性的血清（血浆）样本中筛查处于急性感染期HIV RNA阳性的样本。 集合HIV RNA RT-PCR样本的路线 集合的拆分检测路线 应用集合PCR技术发现窗口期感染者 MSM VCT IDU ? 筛查- ? 筛查+ 集合PCR WB ?+ 结合流行病史，判断窗口期感染 MSM人群早期感染建议检测流程 * 男男性行为人群HIV-1早期感染检测策略及新发感染率研究 婴幼儿HIV感染的诊断 HIV感染产妇生婴幼儿在出生后18个月内可应用HIV核酸检测进行早期HIV感染诊断。 逆转录PCR（RT-PCR）方法，一般需扩增HIV gag 和pol 和env 基因片段。 如果儿童第一次采血时已满12个月，则应首先进行HIV抗体检测。对于抗体阳性者进行HIV核酸检测。如果已满18个月，不做核酸检测。 婴幼儿感染诊断：12月内核酸检测，13-17月先抗体，阳性者检测核酸，18个月以上抗体检测 核酸检测流程 实验室要求 ： 实验室分级：初筛实验室 确证实验室 粤卫[2004]305号文规定：05年6月份前在县级以上收治定点医院建立初筛实验室。填写申请、评审、批准 要求： HIV血清学试验：BSL- Ⅱ(P2) HIV病毒研究： BSL- Ⅲ P3) 初筛实验室设计和建造的要求： ⑴ 有专用实验室（至少专用检测台），应划分清洁区和污染区，并有明显标记，有充足的操作空间。 (2) 实验室墙面、地面、台面材料应来耐酸、碱、易清洁消毒、不渗漏液体；室内应有防蚊、防蝇、防鼠等设备 ⑶ 检验台上应装置紫外灯。 ⑷ 备有消毒药品、消毒器材和消毒设备。 ⑸ 有感应流水装置，备有冲眼睛水，足够的 一次性手套、口罩、隔离服和防护眼镜。 (6) 实验室应装置恒温设备,室温为20~25℃。 BSL Ⅱ实验室： 设计和建造的要求（ 增加）： ⑴ 应有专门放置生物废弃物容器的台(架)。 ⑵ 应设置实施各种消毒方法的设施，如高压灭 菌锅、化学消毒装置等对废弃物进行处理。 ⑶ 应设置洗眼装置。 ⑷ 实验室门宜带锁、可自动关闭。 ⑸ 实验室出口应有发光指示标志。 BSL Ⅱ实验室： 安全设备： Ⅱ生物安全柜或其他物理抑制设备 医务人员艾滋病病毒职业暴露防护工作指导原则(试行)(2004.5.31) ： 第八条 医务人员发生艾滋病病毒职业暴露后，应当立即实施以下局部处理措施： 1 用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤，用生理盐水冲洗粘膜。 2 如有伤口，应当在伤口旁轻轻挤压， 尽可能挤出损伤处的血液，再用肥 皂液和流动水进行冲洗；禁止进行 伤口的局部挤压。 3 受伤部位的伤口冲洗后，应当用消毒液，如75％酒精或0.5％碘伏进行消毒，并包扎伤口，被暴露的粘膜，应当反复用生理盐水冲洗干净 第九条 医务人员发生艾滋病病毒职业暴露后，医疗机构应当对其暴露的级别和暴露源的病毒量水平进行评估和确定 第十条 艾滋病病毒职业暴露级别分为三级 一、发生以下情形，确定为一级暴露： 1 暴露源为体液、血液或者含有体液、 血液的医疗器械、物品。 2 暴露类型为暴露源沾污了有损伤的 皮肤或者粘膜，暴露量小且暴露时 间较短。 二、发生以下情形，确定为二级暴露： 暴露源为体液、血液或者含有体液、 血液的医疗器械、物品。 2 暴露类型为暴露源沾污了有损伤的 皮肤或者粘膜，暴露量大且暴露时 间较长；或者暴露类型为暴露源刺 伤或者割伤皮肤，但损伤程度较轻， 为表皮擦伤或者针刺伤。 三、发生以下情形，