海洋生境芽孢杆菌生物学特性、农药药用应活用性的与关产系生环肽之间的关系-生物工程专业论文.docxVIP

青岛科 青岛科技大学研究生学位论文 海洋生境芽孢杆菌生物学特性、药用 海洋生境芽孢杆菌生物学特性、药用活性与产生环肽之间的关系 万方数据 万方数据 万方数据 万方数据 海洋生境芽孢杆菌生物学特性、药用活性 与产生环肽的关系 摘 要 环肽类化合物是微生物产生的重要活性物质的一大类，具有广泛的生理活性 和研究价值，而芽孢杆菌是该类化合物的重要来源。本文对实验室保存的分离自 海洋具有抗茄链格孢菌活性的芽孢杆菌进行产环肽类化合物产量筛选；利用紫外 线和亚硝酸两种方式对筛选出的产环肽类化合物菌株进行诱变处理，通过小样发 酵以及稳定性测试，获得高产稳定菌株，菌株发酵条件通过正交试验进行了优化。 （1）芽孢杆菌是重要的农药活菌制剂资源菌，其在植物体表现的抑菌活性除了 与本身的抑菌作用有关外，与产生的各种酶活性也有一定的关联，而酶活性往往 与其代谢密切相关，试验发现酶活性与菌株活性与目标化合物的产量成正相关， 得到了 3 株有较高酶活和抑菌活性的菌株 BL10-02、BS10-15 和 BS10-19。 （2）本实验对来自海洋的菌株进行分离纯化获得单菌落的菌株，菌株发酵液进 行环肽产量测试和抑菌活性测试，得到了 2 株活性较高环肽产量较高的菌株 BL10-02，BM10-01。BL10-02 经紫外和亚硝酸诱变后获得 17 株高活性菌株，其 中 7 株菌对真菌茄链格孢菌孢子萌发抑制效果提高了 4 倍；BM10-01 同样经紫 外和亚硝酸诱变后，获得 5 株抑菌活性提高了 2 倍的菌株。BL10-02 的诱变菌株 BL10-02-7 环肽产量比出发菌株产量提高了 49%。 （3） BL10-02-7 该菌株通过培养基条件进行优化，环肽类化合物产量比原始菌 株提高了 57%。对该突变株的培养条件初步优化结果表明，该菌的发酵培养基的 最优配方为：蛋白胨 7g /L, 酵 母 粉 4g/L, 葡萄糖 0.5 g/L , NaCl 30g /L, MgCl2·6H2O 2.3g /L, KCl 0.3g/L, FePO4 0.02g/L,pH7.0,最适培养温度 25℃。 （4）本实验通过收集菌株 B9987 的 4 种不同形态的菌落，研究其形态与生理特 性及环肽产量的关系。四种菌落形态相互比较得出，分散光滑的菌株在传代稳定 和环肽产量方面有较明显的优势，同时有较高的抑菌活性，对于以后菌种选育提 供一定的帮助。 关键词：芽孢杆菌；诱变育种；环肽；发酵；菌落形态 I II RELATIONSHIP BETWEEN THE BIOLOGICAL CHARACTERISTICS OF MARINE HABITATS BACILLUS, PHARMACEUTICALLY ACTIVE AND CYCLIC PEPTIDES ABSTRACT Cyclic peptides are important substances produced by microbes, with a wide range of physiological activity and research value. Many of them are derived from bacillus. In this paper, bacillus producing cyclic peptide compounds derived from marine and this strains may be screened by cyclic peptide production.These strains can be mutagenic ultraviolet and nitrite to get the strains producing high cyclic peptide,and strain fermentation conditions were optimized by orthogonal experiment. （ 1 ） Bacillus is important pesticide formulations of viable resource bacteria, antibacterial activity at its plant in addition to the performance itself inhibitory effect related, and produce a variety of activity also have some relevance, and its metabolic activity is often closely related activity and yield was found tha