在线酶切液相色谱仪PerfinityiDP-三重四极杆液质联用仪-岛津.PDF

  在线酶切液相色谱仪（Perfinity iDP）-三 重四极杆液质联用仪LCMS-8040超快速定性 检测阿胶药材 摘要：Perfinity iDP 液相色谱仪是岛津推出的蛋白质在线酶切系统，可将蛋白质分子在几分 钟内酶切成小分子的肽段。本文使用岛津在线酶切液相色谱（Perfinity iDP ）-三重四极杆质 谱LCMS-8040 联用系统建立了一种超快速定性检测阿胶药材的方法。本方法参照《中国药 典（2015 版）》中阿胶项下，使用NH4HCO3 溶液提取、过滤后，使用串联系统在线完成快 速酶解、分离及检测。本方法选择阿胶的特征肽作为定性依据；按照药典要求建立了 m/z 539.8612.4 和m/z 539.8923.8 检测离子对，结果显示对照品溶液及市售药材样品中阿胶特 征肽的信噪比均远远大于3:1，表明该方法完全满足药典的要求，且将酶切过程由手工的十 几小时缩短为几分钟，可实现阿胶药材的快速、准确、灵敏的定性检测。 关键词：在线酶切液相色谱仪（Perfinity iDP ） 三重四极杆质谱 阿胶 特征肽段 胶类药材是具有典型民族特色的传统 Platform) 是自动化在线蛋白质酶切液相色 中药，为动物的皮熬制而成的明胶类物质， 谱，采用高效率的胰蛋白酶固定化色谱柱， 以补血、升血功能而著称。在2010 版中国 对样品中的蛋白质进行在线酶切。通过使用 药典中通过茚三酮显色法进行定性鉴别，此 已最优化的专用胰蛋白酶酶解缓冲液，提高 方法缺少特异性，不易对不同来源的胶类药 了酶解效率，实现了最快几分钟完成的在线 材进行区分。2015 版药典对鉴定方法进行修 酶切，与传统手工酶切（需要 12-24 小时） 正，把原来的茚三酮显色法改为液质联用的 相比，大大缩短了样品前处理时间；同时在 方法检测特征性肽段，方法更科学可靠。该 重现性方面，由于Perfinity iDP 系统将酶切、 方法使用胰蛋白酶对不同来源的明胶类物 浓缩、分离、检测的一系列过程在线自动化， 质进行酶切处理，通过液质联用技术发现不 降低了人为误差，提高了分析精度。 同样品胶的酶解产物存在特征肽段的差异。 本文利用岛津在线酶切液相色谱 从而通过检测样品胶中的特征肽段对样品 （Perfinity iDP ）- 三重四极杆液质联用 胶的种类进行鉴定。但酶解胶类药材往往需 LCMS-8040 对阿胶中的特征肽段进行了分 要 12 小时以上，难以满足执法部门、企业 析，建立了阿胶药材快速定性的方法，可为 等要求快速、准确得到样品检测结果的需求。 大量胶类药材样品的快速定性分析提供参 Perfinity iDP (Integrated Digestion 考。 作者：孙  谦  西安分析中心 Email: sshsunq@ 李丽潇 上海分析中心 Email: sshllx@  实验部分 1.1 仪器 在线线酶解液相色谱Perfinitty iDP- 三重重四极杆质谱谱LCMS-80440 联用系统统，具体配置置为 LC-220AD ×2输输液泵，DGGU-20A 脱气气机，SIL-200AC 自动进进样器，CTOO-20AC柱温箱， XR 5 HT FCVV-36AH ×2 ，CBM-20A系系统控制器，LC-20AD++LPGE ，LCMMS-8040三重重四极杆质谱谱仪， Perffinity iDP V 0 （工作作站），LabSSolutions Verr. 5.80 CHS色色谱工作站。 图1 Perffinity iDP 系统及流路图 Perffinity iDP 工作作原理：Perffinity iDP 工作作时分为三个个程序，依次次是酶解、