龟鹿二仙汤药物血清对鼠成骨细胞的增殖周期与凋亡的影响-中西医结合临床专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 目 录 中文摘要…………………………………………………………………Ⅰ ABSTRACT………………………………………………………………Ⅱ 前 言…………………………………………………………………… 1 实验研究 …………………………………………………………………2 一、实验----龟鹿二仙汤药物血清对鼠成骨细胞的增殖周期与凋亡 的影响 ……………………………………………………………2 （一）实验材料与方法 ………………………………………………2 1.实验动物 ………………………………………………………2 2.实验试剂 ………………………………………………………2 3.实验仪器 ………………………………………………………2 4.实验方法 ………………………………………………………3 二、结果 ………………………………………………………………5 三、分析与讨论 ………………………………………………………10 四、结论 ………………………………………………………………15 参考文献 …………………………………………………………………16 文献综述 …………………………………………………………………18 3 中文摘要 龟鹿二仙汤药物血清对鼠成骨细胞的增殖周期与凋亡的影响 目的：探讨龟鹿二仙汤药物血清对成骨细胞(osteoblast，OB)增殖周期与凋亡的调控作 用。 方法：颅骨酶解法培养OB，分别予以10％-20％系列浓度的对照鼠血清或中药血清培养， 应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法及茜素红染色方法观察体外培养成骨细胞、碱性 磷酸酶及矿化结节的变化,流式细胞仪分析DNA含量，Annexin V-FITC／PI双标记 流式细胞仪分析细胞早期凋亡。 结果：含药血清组明显增加了成骨细胞数量、碱性磷酸酶的表达水平及矿化结节的形成, 作用随剂量的增加而增加,DNA含量分析显示与相应对照组相比，10-20％药物血 清组的S期和G2／M期细胞百分比明显增加，G0／G1期细胞百分比明显下降，细胞 增殖指数(PI)显著增加(分别为P0.05和PO.O1)；10-20％的药物血清还具有显 著的抗凋亡作用(分别为P0.05和P0.01)。 结论：龟鹿二仙汤药物血清可以呈剂量依赖性地促进成骨细胞增殖 龟鹿二仙汤药物血 清在体外可有效地促进鼠OB的增殖周期，从而促进OB增殖并抑制其凋亡。 主题词：细胞周期；增殖；凋亡；龟鹿二仙汤；成骨细胞 4 Abstract Efects of Pharmacological Serum after Treated by GuiLuErXianTang on Proliferating Cycle and Apoptosis of Murine Osteoblast Objective：To investigate into the efects of the GuiLuErXianTang-treated pharmacological serum on the proliferating cycle and apoptosis of osteoblasts(OBs)． Methods：The OBs were isolated by the enzyme-digested assay then cultured．The OBs were treated in vitro with the pharmacological seram in a series of concentration，then used the method of MTT , para - nit ro - pheneye phosphate and the tinctorial method of alizarin Bordeaux to observe the effect of Hongqu on such aspect s as the proliferation , AL P expression , and mineralization tuberculation of the Osteoblast .The apoptosis rate and DNA content of OBs were analyzed by flow cytometry (FCM)，and their ultrastructure was evaluated by TEM． Results：GuiLuErXianTang medicine serum could obviously increace the quantity of osteoblast，the level of the ALP expression and mineraliza