光谱法研究四类含氮稠环小分子与牛血清白蛋白的相互作用-化学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 Interaction of Four Classes of Nitrogenous Fused Ring Micromolecule and Bovine Serum Albumin by Spectroscopic methodology Type of Degree Scholastic degree Discipline (Type of Professional Degree) Chemistry Candidate Liao，Zhixi Student Number 12010601018 Supervisor and Professional Title Yu, Xianyong Associate Professor Yi, Pinggui Professor Practice Mentor and Professional Title School School of Chemistry and Chemical Engineering Date 27th May, 2015 University Hunan University of Science and Technology 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的 研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或 集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均 已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。 作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借 阅。本人授权湖南科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库 进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 涉密论文按学校规定处理。 作者签名： 日期： 年 月 日 导师签名： 日期： 年 月 日 摘 要 蛋白质是体内含量丰富的生物大分子，同时也是表达各种生物功能的基本物质。血 清白蛋白(serum albumin, SA)是血浆中含量最多的物质，作为蛋白质的代表物质，在药 物的运输及存储方面有着重要的作用。由于牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA) 在结构及功能上与人血清白蛋白(human serum albumin, HSA)有着极大的相似性，故常常 被选作研究对象。本论文在模拟人体生理条件下，运用光谱法研究 BSA 与几类含氮稠 环小分子相互作用，主要包括以下四个部分： 1. 运用光谱技术研究了含有不同取代基的吡哩酮(NSCP)与 BSA 的相互作用。结果 表明，NSCP 对 BSA 的内源荧光有较强的荧光猝灭作用，且 NSCP 对 BSA 猝灭为静态 猝灭机制。各取代基与 BSA 结合能力的大小通过计算得到的结合常数对比得到。根据 Van’t Hoff 计算得到各热力学参数，得到 NSCP 与 BSA 之间的主要作用力类型。 2. 在 298、304 和 310 K 三个温度下探究了羰基稠合氮混杂卟啉(CF-NCP)对 BSA 的猝灭机理。用 Stern-Volmer 公式处理试验数据, 发现 BSA 与 CF-NCP 发生反应生成 了新的复合物，属于静态荧光猝灭。通过改进的双对数公式求出了 CF-NCP 与 BSA 的 结合常数(KA)和结合位点数(n)，由 n 约为 1，说明二者在反应过程中约以 1:1 相结合形 成 BSA-(CF-NCP)复合物，且该结合能力较大。 3. 运用荧光光谱、紫外光谱和圆二色光谱法, 研究了法可林(PCL)与 BSA 的结合反 应。以 Stern-Volmer 方程和能量传递原理分别计算了 PCL 与 BSA 反应的结合常数(KA) 和结合距离(r)以及由热力学参数的计算判断了 PCL 与 BSA 结合的主要作用力为氢键和 范德华力。此外，同步荧光光谱及圆二色光谱均证明了 BSA 分子构象发生了变化。 4. 在模拟生理条件下, 用光谱法研究了贝西沙星(BFLX)对 BSA 荧光光谱特性的影 响。实验结果表明, BFLX 可以使 BSA 的荧光强度发生猝灭。在实验浓度和温度范围内， BFLX 与 BSA 可结合形成具有一定结构的复合物，荧光猝灭作用符合静态猝灭作用特 征。根据热力学参数求得静电力是主要作用力；所得数据为研究 BFLX 的药理作用和生 物学效应，以及 BFLX 对蛋白质构象的影响等提供了重要信息。 关键词：牛血清白蛋白；含氮稠环小分子；荧光光谱法；紫外可见光谱法； 圆二色光谱法