嗜热菌Boc川Ms如一ii3—2海因酶的纯化及性质-生物加工过程.PDF

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Nov.2007 生物加工过程 第5卷第4期 of ·32· ChineseJou皿al BioprocessEn矛nee^“g 2007年11月 3—2海因酶的纯化及性质 嗜热菌Boc川Ms如一ii 孙倩倩,潘瑶,姚忠;何冰芳 (南京工业大学制药与生命科学学院,南京210009) 摘要:对自行筛选的海固酶法厶苯丙氨酸生产茵株B钟埘附如商i3_2中的海因酶进行了分离纯化厦相关性质研究。 该海因酶协同}氨甲酰水解酶是海固酶法生产厶氨基酸的关键酶。最知戚i30茵悬液经压力破碎离心后取上清液 为粗酶液,粗酶液通过硫酸铵分级沉淀、P岫ylFT(h讪sub)疏水层析以厦soIlIce15Q离子交换层析,经sDs 分析达到电泳纯,亚基相对分子质量为55×10’,海因酶的纯化回收率为2n5%.纯化倍数为149.23。该海因酶在pH 8.0—1n0的范围内具有较高的活性,在45—70℃具有很高的酶活力,最适反应pH和温度分别为10.0℃和65℃。 纯酶易氧化失活,哪对谅酶有一定的保护作用。二价金属离子。M一+、c02+及Fen对酶活性有显著的促进作用。而 caz+、cu“等时酶活性有押制作用。相关研究可为谊菌株茂海因酶的进一步开发与应用提供理论指导。 关键词:海固酶;觑珊瑚知栅f3.2;纯化;酶学一雎质 中图分类号:Q55 文献标识码:A 文章编号:1672—3678(2007)04—0032—05 Purmcationandcharacterization oflIydaIItoinase from thermophilus曰口c溉博扣r颤3_2 SUN Yao,YA0 Qian—qian,PANzhong,HEBing—fang scien∞曲d of“fe Ph唧aceudcal (cou。ge oflkhnology,N蚰jitlg210009.ch;m) ErIginee五“g,N舯jingurIiver吕ity of 3- Abstract:卟epud丘c“on卸dpropenies byd蚰toinase‰m£一phenylalaJlin6pmducer砒d盯瑚扣戚i 2of inthe hydantoina鸵processwe陀studied.HydantoinaseBnd£一ca小锄oyla鸵arebo山keybiocatalyst8 0f 3-2was tohom- productionthe叩ticallypure£-amjnoacids.Hydalltoin8se舶mB们i髓出加趟i pu一6ed suⅡ乱e interaction ogeneityby哪moniumfjactionation,PhenylFF(highsub)hydmphobicchromatogra- ion a of

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