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Nov.2007 生物加工过程 第5卷第4期
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·32· ChineseJou皿al
BioprocessEn矛nee^“g 2007年11月
3—2海因酶的纯化及性质
嗜热菌Boc川Ms如一ii
孙倩倩,潘瑶,姚忠;何冰芳
(南京工业大学制药与生命科学学院,南京210009)
摘要:对自行筛选的海固酶法厶苯丙氨酸生产茵株B钟埘附如商i3_2中的海因酶进行了分离纯化厦相关性质研究。
该海因酶协同}氨甲酰水解酶是海固酶法生产厶氨基酸的关键酶。最知戚i30茵悬液经压力破碎离心后取上清液
为粗酶液,粗酶液通过硫酸铵分级沉淀、P岫ylFT(h讪sub)疏水层析以厦soIlIce15Q离子交换层析,经sDs
分析达到电泳纯,亚基相对分子质量为55×10’,海因酶的纯化回收率为2n5%.纯化倍数为149.23。该海因酶在pH
8.0—1n0的范围内具有较高的活性,在45—70℃具有很高的酶活力,最适反应pH和温度分别为10.0℃和65℃。
纯酶易氧化失活,哪对谅酶有一定的保护作用。二价金属离子。M一+、c02+及Fen对酶活性有显著的促进作用。而
caz+、cu“等时酶活性有押制作用。相关研究可为谊菌株茂海因酶的进一步开发与应用提供理论指导。
关键词:海固酶;觑珊瑚知栅f3.2;纯化;酶学一雎质
中图分类号:Q55 文献标识码:A 文章编号:1672—3678(2007)04—0032—05
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Abstract:卟epud丘c“on卸dpropenies
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