药物设计学-基因技术医学.ppt

The Principle of Drug Design—第六章 基因技术是一系列有关研究基因结构和功能的方法之一，是一项将生物的某个基因通过基因载体运送到另一种生物的活性细胞中，并使之无性繁殖（称之为“克隆”）和行使正常功能（称之为“表达”），从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术，描述这些方法的术语包括“DNA重组技术”、“基因工程”、“基因拼接”等。 1．利用基因工程技术可以获得天然来源难以得到的生理活性物质，并可提供足量的生物活性物质以进行结构、功能、性质等方面的研究，使之成为新药，并避免由于免疫抗原性等原因而带来的副作用。 2.利用基因工程技术可以向生物环境中引入能编码目的蛋白质的基因，这种蛋白质可再此环境中被大量的生产。 ○例如使某些活性蛋白、多肽基因在微生物、细胞以及动物、植物反应器中得到高效表达，使许多难以得到的生物活性物质如胰岛素、干扰素等批量生产。 3．利用基因工程技术可不断发掘和开发更多的新型生理活性物质。 ○例如红细胞生长素（EPO）、神经生长因子（NGF）等。 4. 利用基因工程技术可以改造内源性活性物质，对蛋白质的特异位置进行修饰，可以改变氨基酸的序列，在编码基因中引入特异的突变体，从而改变其物理化学性质，提高其生物活性、减少副作用 ○如将组织纤溶酶原激活剂tPA分子重组缩小后，半衰期明显延长，注射一次即可溶栓。 5．通过基因重组技术，能够获得新的化合物（包括自然界不存在的化合物），扩大药物来源，这正是制药工业引进基因工程的主要原因之一。 1973年,美国斯坦福大学医学院Prof.Coben及其研究小组把大肠杆菌质粒DNA酶切后插入抗四环素基因,组成一个可在大肠杆菌种复制,并表达出具有抗四环素及大肠杆菌质粒DNA双抗遗传表型的重组子 日新月异的生物技术不断推动着这场革命，生物工程药物将成为21世纪药业的支柱。 与生物制药直接相关的最新领域包括；组合化学（combinatorial chemistry）、药学基因（pharmacogenomics）、蛋白组学（proteomics）、蛋白治疗（gene therapy）、功能抗原学（functional antigenics）、生物信息学（bioinformatics）、高通量筛选（high-throughput screenign）和众所周知的基因组学（genomics，包括后基因组学）等。 一 基本知识 二 基因技术的一般介绍 重组蛋白的表达 一、基本知识 染色体上具有遗传作用的是脱氧核糖核酸即DNA。DNA链由两条碱基互补的脱氧核苷酸链反向平行旋转形成双螺旋结构。每个脱氧核苷酸由一个碱基、一个脱氧核糖及一个磷酸分子组成。碱基的不同决定了脱氧核苷酸种类的不同。 DNA中的碱基种类有四种：腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（G）、胸腺嘧啶（T）、胞嘧啶（C）。 基因是DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，是遗传物质的最小功能单位。 基因是带有遗传性状的DNA片段，每个基因具有自身的遗传密码。基因决定着蛋白质的合成，有 “一个基因一个多肽链”的说法。 基因决定蛋白质，蛋白质决定代谢作用，代谢作用决定各种性状。 1、 核酸的分类和组成 核酸分为两大类. 脱氧核糖核酸（DNA） Deoxyribonucleic Acid 核糖核酸（RNA） Ribonucleic Acid。 脱氧核糖核酸（DNA） DNA分子含有生物物种的所有遗传信息，分子量一般都很大。 DNA为双链分子，其中大多数是链状结构大分子，也有少部分呈环状结构。 核糖核酸（RNA） RNA的功能与特征 RNA主要是负责DNA遗传信息的翻译和表达，分子量要比DNA小得多。RNA为单链分子。 RNA的类别 根据RNA的功能，可以分为mRNA、tRNA和rRNA三种。 2、核酸的结构 ⑴ 核酸的一级结构 多聚核苷酸是由四种不同的核苷酸单元按特定的顺序组合而成的线性结构聚合物，因此，它具有一定的核苷酸顺序，即碱基顺序。 核酸的碱基顺序是核酸的一级结构。 DNA的碱基顺序本身就是遗传信息存储的分子形式。生物界物种的多样性即寓于DNA分子中四种核苷酸千变万化的不同排列组合之中。 而mRNA(信息RNA)的碱基顺序，则直接为蛋白质的氨基酸编码，并决定蛋白质的氨基酸顺序。 ① RNA一级结构的特点 RNA一级结构研究最多的是tRNA、rRNA以及一些小分子的RNA。其中 tRNA分子具有以下特点： 分子量25000左右，大约由70－90个核苷酸组成，沉降系数为4S左右。 分子中含有较多的修饰成分。 3-末端都具有CpCpAOH的结构。 mRNA一级结构的特点 真核细胞mRNA的3‘-末端有一段长达200个核苷酸左右的聚腺苷酸(polyA)，称为 “尾结构” ，5’ -末端有一个甲基