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安徽农业大学学报, 2016, 43(3): 420-426
Journal of Anhui Agricultural University
[DOI] 10.13610/ki.1672-352x024 网络出版时间：2016-5-12 16:10:54
[URL] /kcms/detail/34.1162.S1610.048.html
小鼠DAZL 基因启动子核心区域分析
及甲基化对其启动活性的影响
1,2 1 1,2 1,2 1,2 1,2
王颖洁 ，张文慧 ，朱 睿 ，左其生 ，李 东 ，王 飞 ，
1,2 1,2 1 1,2 1,2*
路镇宇 ，纪艳芹 ，王 曼 ，张亚妮 ，李碧春
(1. 扬州大学动物科学与技术学院，扬州 225009 ；2. 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室，扬州 225009)
摘 要： 旨在确定小鼠DAZL 启动子基本活性区，并分析启动子区域甲基化对其启动子活性的影响，探究小鼠
DAZL 的表达调控机制。采用PCR 法扩增不同长度的小鼠DAZL 启动子，插入到pEGFP-N1 和pGL3-Basic 载体，构
建重组载体。将重组载体转染GC-1 细胞系，并通过添加适量DNA 甲基化转移酶抑制剂（5-azacytidine，5-aza-C ）逆
转各试验组启动子片段的甲基化水平，然后利用双荧光素酶报告基因检测系统检测 DAZL 活性变化。双荧光素酶活
性检测结果表明，小鼠Dazl 启动子基本活性区域为5’侧翼区 -370 ~ -36 bp ，在-370 ~ -166 bp 区域存在不可或缺的重
要调控元件；经5-aza-C 处理后，各缺失片段载体转染的GC-1 细胞DAZL 的启动子活性与对照组相比均有不同程度
的提升，但差异不显著。本试验确定了小鼠DAZL 启动子基本活性区域，证明降低小鼠睾丸DAZL 启动子区域甲基
化水平，有助于DAZL 在生殖细胞中特异性表达，为进一步探究DAZL 生物学功能和调控机制提供参考。
关键词：DAZL；启动子甲基化；5-aza-C；基因活性
中图分类号：S865.133 文献标识码：A 文章编号：1672−352X (2016)03−0420−07
Study on the core region of DAZL gene promoter and the effect
of methylation on promoter activity in mice
WANG Yingjie1,2 1 1,2 1,2 1,2 1,2
, ZHANG Wenhui , ZHU Rui , ZUO Qisheng , LI Dong , WANG Fei ,
1,2 1,2 1 1,2 1,2
LU Zhenyu , JI Yanqin , WANG Man , ZHANG Yani , LI Bichun
(1. College of Animal Science Technology, Yangzhou University, Yangzhou 225009;
2. Key Laboratory of Animal Breeding Reproduct
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