甲基蓝体系共振瑞利散射法测定蛋白质.PDF

2006, Vol. 27, No. 03 199 1 2 邵辉莹 ，张爱梅 (1.山东大学化学化工学院，山东 济南 250100；2.聊城大学化学化工学院，山东 聊城 252059) ：在pH2.36 的BR 介质中，甲基蓝与蛋白质相互作用生成复合物，使最大波长 350nm 的共振光散射光谱得 到增强，增强程度与蛋白质浓度成正比。据此建立了测定蛋白质的新方法。人血清白蛋白、牛血清白蛋白的线性 范围分别为0～2.4mg/L、0～2.8mg/L，相应检出限分别为39.3、43.4μg/L。方法的稳定性好，灵敏度高，用于 牛奶、豆浆、人血清、尿液中总蛋白质的测定，结果与考马斯亮蓝法一致。 ：甲基蓝； 共振光散射； 蛋白质 Determination of Protein with Methyl Blue by the Rayleigh Light Scattering Method 1 2 SHAO Hui-ying ，ZHANG Ai-mei (1.College of Chemistry and Chemical Engineering, Shandong University, Jinan 250100, China； 2.Institute of Chemistry and Chemical Engineering, Liaocheng University, Liaocheng 252059, China) Abstract ：In Britton-Robinson buffer of pH2.36, the binding reaction of methyl blue with proteins enhances remarkably the resonance Rayleigh light-scattering (RLS) signal at maximum wavelength of 350 nm and forms complexes. It is found that the enhanced RLS intensities are in proportion to the concentrations of protein. Based on this, a new method for the determination of proteins using methyl blue as indicator has been developed. Bovine serum albumin and human serum albumin could be determined 收稿日期：2005-02-28 作者简介：邵辉莹(1974-)，女，讲师, 硕士研究生，主要从事蛋白质分析的研究工作。 2.4 用二甲苯进行预处理，测定不同果蔬中维生素 C 3.1 直接滴定法和改进后的滴定法测定结果的差异性极 的含量 显著，说明只有改进后的滴定法才可用来测定西瓜等含 从测定的结果来看，二甲苯可以完全萃取果蔬， 有大量番茄红素的果蔬中 VC 的含量。 表4 果蔬中VC的含量 3.2 改进后滴定法的标准偏差(S)和变异系数(CV)均小于 Table 4 The contain of VC in the Fruit 直接滴定法,其回收率也较高，说明改进后的滴定法可以 项目 果蔬 花瓜 黑瓜 番茄 樱桃番茄 胡萝卜 柿子