甲基转移酶活性测试与醣蛋白纯化的救星-岑祥.PDF

轉譯醫學研究 後轉譯修飾-後轉譯修飾- 甲基轉移酶活性測試與醣蛋白純化的救星甲基轉移酶活性測試與醣蛋白純化的救星 撰文：謝馨慧 有人說愛美是女人的天性，為了吸引眾人的目光，每 胺酸會對甲基轉移酶有負迴饋的作用，其關鍵在於腺同 當出門時總是細心打扮，後轉譯修飾（post-translational 半胱胺酸會受到核苷酸酶(nucleosidase)催化而釋出腺 modification,PTM ）就是蛋白質修飾加工，讓自己發揮 嘌呤(adenine)，進而對甲基轉移酶產生負迴饋，導致常 最大的價值。當蛋白質被轉譯出來後，需要經過加工處 常的誤判實驗結果。 理，才會有功能或活性，進而發揮功效。許多作用都屬 於PTM ，包含磷酸化、甲基化、醣基化或是乙醯化等等 ，實驗過程相當繁複，因此多數實驗人員希望不要被指 定做這一類的實驗，所以本文要跟大家簡單介紹偵測甲 基化與醣蛋白的大救星。 甲基化 甲基化 MethylationMethylation 甲基化 甲基化在生物體之作用牽涉範圍相當廣泛，包含訊息 傳遞、生物合成、蛋白質修復、轉譯修飾、染色質的調 控，都需藉由甲基化的作用進行其下游之路徑調控，也 因為甲基化參與體內許多生化反應，因此也有許多文獻 指出不正常的甲基化會導致疾病的產生。例如:體內不正 常的甲基化會增加動脈粥狀硬化發生之機率，另外若在 圖1. SAM Methyltransferase Assay原理 Promoter C G 啟動子( )上之胞嘧啶（ ）和鳥嘌呤（ ）大量 重複序列的區域 (CpG island)過度甲基化，也會促使抑 SAM265: SAM Methyltransferase AssaySAM265: SAM Methyltransferase Assay 癌基因不活化而導致癌症的生成。陸續發現許多疾病也 為了解決這樣的問題，G-Biosciences利用腺甘脫胺 跟甲基化相關，雖然甲基化並不是體內唯一重要的生化 酶(adenine deaminase)幫忙，將腺嘌呤轉換成亞黃嘌呤 反應，但也是值得重視和注意的議題。 hypoxanthine 265nm （ ），利用波長 間接得到其酵素活 S-腺苷基甲硫胺酸(S-adenosylmethionine ,SAM)又 性，例如SAM265: SAM Methyltransferase Assay 。 AdoMet DNA 名 ，在 或蛋白質修飾作用中為甲基捐贈者， 當腺嘌呤轉換成越多的亞黃嘌呤時，吸光值會下降， 帶有一分子的活化甲基，故在甲基化機制中常藉由甲基 藉由這樣的方式去回推S-腺苷基甲硫氨酸-甲基轉移酶之 轉移酶(methyltransferases)作用轉移其甲基，為常見輔 2 活性(圖 )。但是此方法也有一些實驗上的限制，例如波 酶。其重要性可從轉錄或轉譯作用即可窺探，在mRNA