银杏蜜环口服溶液对缺氧缺糖再灌注诱导脑微血管内皮-世界中医药.PDF

·１２· ＷＯＲＬＤＣＨＩＮＥＳＥＭＥＤＩＣＩＮＥ　Ｊａｎｕａｒｙ２０１８，Ｖｏｌ．１３，Ｎｏ．１ 银杏蜜环口服溶液对缺氧缺糖再灌注诱导脑微血管内 皮细胞和ＳＨＳＹ５Ｙ细胞炎性损伤的保护作用与机制 １ １ １ １ １ ２ ２ １ 郑咏秋 　张业昊 　刘建勋 　徐　立 　李　磊 　王益民　王　勇　王光蕊 （１中国中医科学院西苑医院，基础医学研究所，北京，１０００９１；２西安步长中医心脑病医院，西安，７１００８２） 摘要　目的：探讨银杏蜜环口服溶液对缺氧缺糖再灌注诱导脑微血管内皮细胞和神经胶质瘤细胞ＳＨＨＹ５Ｙ损伤的保护 机制，以及其对ｅＮＯｓ介导的Ｂｅｃｌｉｎ１依赖的自噬通路的影响。方法：本研究采用缺氧缺糖再灌注诱导大鼠脑微血管内皮 细胞和神经胶质瘤细胞ＳＨＨＹ５Ｙ构建糖氧剥离＋复糖复氧模型，同时给予不同浓度的银杏蜜环口服溶液（５１５ｍｇ／ｍＬ、 ２５７５ｍｇ／ｍＬ和１５４５ｍｇ／ｍＬ）及有效组分进行干预，通过观察细胞培养上清炎性因子ＩＬ１、ＴＮＦ和ＩＬ６的浓度和自 β α 噬通路的活化，并采用ＰＩ／ＡｎｎｅｘｉｎＶ双染色分析细胞凋亡率，探讨银杏蜜环有效成份的脑保护机制。结果：银杏蜜环口服 溶液５１５ｍｇ／ｍＬ、２５７５ｍｇ／ｍＬ和１５４５ｍｇ／ｍＬ３个剂量组均可抑制脑微血管内皮细胞上清液ＴＮＦ、ＩＬ１ 和 ＩＬ６含 α β 量，银杏蜜环口服溶液２５７５ｍｇ／ｍＬ和１５４５ｍｇ／ｍＬ可抑制 Ｃａｓｐａｓｅ３、ＬＣ３ＩＩ和 Ｂｅｃｌｉｎ１表达。同时，银杏蜜环口服溶液 ２５７５ｍｇ／ｍＬ明显促进ｅＮＯｓ的磷酸化。其中对Ｌ１和ＩＬ６的作用明显优于银杏叶提取物和天麻蜜环菌。银杏蜜环口 β 服溶液２５７５ｍｇ／ｍＬ和１５４５ｍｇ／ｍＬ还可降低ＳＨＳＹ５Ｙ细胞的凋亡率（ＡｎｎｅｘｉｎＶ＋／ＰＩ细胞），差异有统计学意义。结 论：银杏蜜环口服溶液可通过促进一氧化氮合酶ｅＮＯｓ的磷酸化来抑制缺糖缺氧再灌引发的细胞凋亡和自噬。 关键词　银杏蜜环；缺氧缺糖再灌注；脑微血管内皮细胞；ＳＨＳＹ５Ｙ；自噬 ＳｔｕｄｙｏｎＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＥｆｆｅｃｔｓａｎｄＭｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆＹｉｎｘｉｎｇＭｉｈｕａｎＯｒａｌＳｏｌｕｔｉｏｎｏｎＣｅｒｅｂｒａｌＭｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒＥｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ＣｅｌｌｓａｎｄＩｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙＩｎｊｕｒｙｏｆＳＨＳＹ５ＹＣｅｌｌｓＩｎｄｕｃｅｄｂｙＯｘｙｇｅｎ／ＧｌｕｃｏｓｅＤｅｐｒｉｖａｔｉｏｎａｎｄＲｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ １ １ １ １ １ ２ ２ １ ＺｈｅｎｇＹｏｎｇｑｉｕ，ＺｈａｎｇＹｅｈａｏ，ＬｉｕＪｉａｎｘｕｎ，ＸｕＬｉ，ＬｉＬｅｉ，ＷａｎｇＹｉｍｉｎ，ＷａｎｇＹｏｎｇ，ＷａｎｇＧｕａｎｇｒｕｉ （１ＸｉｙｕａｎＨｏｓｐｉｔａｌ，ＣｈｉｎａＡｃａｄｅｍｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００９１，Ｃｈｉｎａ；２Ｘｉ′ａｎＢｕｃｈａｎｇ ＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＣａｒｄｉｏＣｅｒｅｂｒｏｖａｓｃｕｌａｒＤｉｓｅａｓｅＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｘｉ′ａｎ７１００８２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆＹｉｎｘｉｎｇＭｉｈｕａｎＯｒａｌＳｏｌｕｔｉｏｎｆｏｒｃｅｒｅｂｒａｌｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ（ＣＭＥＣ）ａｎｄＳＨＳＹ５Ｙｃｅｌｌｓｏｎｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｉｎｄｕｃｅｄｂｙｏｘｙｇｅｎ／ｇｌ