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蓝耳(TJM-F92)资料整理 蓝耳疫苗:活疫苗 : 经典PRRS疫苗: CH-1R R98株 高致病性PRRS活疫苗: 天津株(TJM-F92) 湖南株(HuN4-F112株) 江西株(JXA1-R株) 2.高致病PRRS活疫苗生产厂家 江西株(JXA1-R株): 中牧成都厂,广东大华农,扬州威克,广东永顺,武汉中博等。 湖南株(HuN4-F112)株: 哈尔滨维科,上海海利,吉林正业, 黑龙江一厂。 天津株(TJM-F92): 北京华威特,吉林国原,新疆天康,青岛易邦,山西隆克尔。 3.疫苗毒株安全与效力关系: 病毒细胞传代次数 5代 20代 40代 60代 90代 120代 病毒效价(TCID50/ml) 4.5 5.0 6.5 7.5 7.5 7.5 发病率(%) 100 50 30 10 0 0 死亡率(安全) 50 10 0 0 0 0 保护率 100 95 90 85 80 70 安全性 低------------------------------高 有效性 高------------------------------低 4.PRRSV传代致弱机理: TJM-F92株(蓝特威)疫苗致弱机理 传代病毒:PRRSV TJ株F3(强毒) 传代细胞:Marc-145细胞 强毒共传代92代做为疫苗原始种毒 病毒纯化:每5-10代进行一次噬斑克隆纯化 JXA1株(大华农)疫苗致弱机理 传代病毒:PRRSV JX株F5(强毒) 传代细胞:Marc-145细胞 强毒共传代90代做为疫苗原始种毒 JXA1株(中牧)疫苗致弱机理 传代病毒:PRRSV JX株F5(强毒) 传代细胞:Marc-145细胞 强毒共传代90代做为疫苗原始种毒 5.TJ株不同代次Nsp2基因缺失电泳图: M, 3, 16, 18, 24, 31, 62, 74, 78, 80, 82, 92, 97, 112, 122, 132 M, 3, 16, 18, 24, 31, 62, 74, 78, 80, 82, 92, 97, 112, 122, 132 解释:F3和F16大小为1004bp;F18代后Nsp2基因序列缺失360核苷酸,片段大小约644bp左右,说明F17代克隆噬斑后选择一株基因缺失毒株。 6.TJ株不同代次Nsp2序列PCR扩增结果: 解释:F3和F17大小为1004bp;F18代后Nsp2基因序列缺失360核苷酸,片段大小约644bp左右,说明F17代克隆噬斑后选择一株基因缺失毒株。 7.PRRSV TJ株F3、F15、F18和TJM-F92株接种试验动物体温变化曲线 8.病毒分离结果(病毒血症天数): Group 攻击后天数 2d 4d 6d 8d 10d 12d 14d 16d 18d 20d 空白对照 0/3 0/3 0/3 0/3 0/3 0/3 0/3 0/3 0/3 0/3 F3强毒 3/3 3/3 2/3 2/3 2/2 2/2 1/1 1/1 1/1 1/1 F15缺失前 2/3 3/3 3/3 3/3 3/3 3/3 3/3 3/3 3/3 2/3 F18缺失后 1/3 3/3 3/3 2/3 3/3 3/3 1/3 0/3 0/3 0/3 F92疫苗株 1/3 3/3 3/3 3/3 3/3 1/3 2/3 0/3 0/3 0/3 解释:F3强毒接种后,病毒血症全程都有,说明维持时间最长,并且致死率最高。 F15较强毒接种后,病毒血症全程都有,说明维持时间较长,并且致死率较高。 F18较弱毒接种后,病毒血症仅十来天左右,说明维持时间较短,并且致死率较低。 F92弱毒接种后,病毒血症仅十来天左右,说明维持时间最短,并且致死率最低。 9.不同代次病毒血症和死亡率 分组 毒血症 (攻击后天数) 死亡率 空白对照 0 0/3 F3强毒 20 2/3 F15缺失前 ≥20 0/3 F18缺失后 ≤14 0/3 F92疫苗株 ≤14 0/3 10.TJM-F92株Nsp2基因缺失示意图 1a 1a 1b 2a 2b 4 3 5 6 7 5’CAP RNA 多聚酶(RNA Polymerase) 结构蛋白(Structure Protein) (A)n Nsp2 基因 经典PRRS病毒RNA 基因结构示意图 高致病性PRRSVNsp2基因90核苷酸缺失 TJM-F92疫苗株Nsp2基因360核苷酸缺失 90核苷酸缺失 360核苷酸缺失 11.TJM-F92株疫苗基因缺失意义 基因缺失标记疫苗,是国际疫苗发展

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