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雷公藤甲素降低肝移植大鼠急性排斥反应的实验研究 侍阳(通讯作者) 宋庆伟 于牛才 邹海明 (徐州医学院附属医院普外科 江苏 徐州221002) 【摘 要】目的：观察雷公藤甲素(TPL)对大鼠原位肝移植急性排斥反应 的影响。方法：建立大鼠原位肝移植模型，共60只，随机分为对照组、环抱素 A (CsA)组及TPL组。对照组口服牛理盐水2mL/d, CsA组腹腔注射CsA 10 mg/ (kg?d), TPL组口服灌胃TPL 20 mg/ (kg?d),连续灌胃7 d后每组各处死大鼠 10只，测定血清牛化指标与细胞因子水平。观察肝脏病变情况，计算肝组织排 斥活动指数(RAI)o观察各组未处死大鼠的生存期。结果：术后1周，CsA组及 TPL组大鼠血清ALT、AST、TNF-alpha;、IL?2和IFN-gamma冰平均低于对照组 (Plt;0.05)。对照组肝组织标木均呈现重度排斥反应;CsA组及TPL组分别有3、 4例标木呈重度排斥反应，其余均为中度排斥反应。CsA组、TPL组RAI均明显低 于对照组(Plt;0.05)；术后CsA组及TPL组存活期长于对照组(Plt;0.05)o结 论：TPL可减轻大鼠肝移植急性排斥反应，延长模型大鼠牛存期。 【关键词】雷公藤甲素；肝移植；排斥反应 【中图分类号］R-332 【文献标识码］A 【文章编号】1004-6194(2015 ) 01-0107-02 近年来的临床实践表明，肝脏移植是治疗终末期肝病的最有效手段，但肝移 植后机体的急性排斥反应发牛率较高⑴。急性排斥反应是早期移植缺失的重要 原因，也是严重影响受体肝移植后长期牛存的危险因素［2］。因此，肝移植急性 排斥反应的治疗己经成为目前临床面临的重要问题。雷公藤甲素(triptolide,TPL) 是中药雷公藤主要的有效成分，近年来研究发现，TP具有很强的免疫抑制作用， 能够显著抑制大鼠肾脏移植的急性排斥反应［3,4］o我们于2013年1-3月观察了 TP对对大鼠肝移植急性排斥反应的影响，现报告如下。 1材料与方法 1.1材料 TPL (纯度gt;98%)与环抱素A (CsA,纯度gt;99%)均购自上海高科生物 工程有限公司。肿瘤坏死因子-alpha; (TNF-alpha;)＞白细胞介素?2 (IL-2)＞干 扰M-gamma; (IFN-gamma;)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、等试 剂盒均购自上海西唐生物科技有限公司。DA与Lewis大鼠(清洁级)60只，雄 性，体重为200-280 g,购自北京维通利华实验动物有限公司。 1.2实验方法 以雄性DA大鼠为供体，Lewis大鼠为受体，采用改良的“二袖套法”建立 原位肝移植模型［5］。造模成功后，随机分为对照组、CsA组及TPL组各20只。 对照组予生理盐水灌胃，2mL/d； CsA组腹腔注射CsA 10 mg/ (kg?d), TPL组口 服灌胃 TPL20 mg (kg?d),连续 7d。 1.3生化指标与细胞因子测定 肝移植7 d后，大鼠经水合氯醛麻醉，每组随机处死10只，取下腔静脉血， 利用全自动生化分析仪测定血清ALT与AST浓度,ELISA法检测血清TNF-alpha;、 IL?2、IFN-gamma;水平。 1.4急性排斥反应指数(RAI) 取肝移植受体大鼠的肝组织进行蜡块切片，观察肝组织病理学变化。RAI评 分标准参照Banff分级标准⑹，总分为9分，lt;3分为非确定型急性排斥反应, 3~5分为轻度急性排斥反应，5~7分为中度急性排斥反应，7~9分为重度急性排 斥反应。 1.5存活期观察 观察未处死的肝移植受体大鼠术后存活情况，统计存活时间。 1.6统计学方法 采用SPSS 17.0进行统计学处理。两组样本均数间比较采用t检验，多组间 采用单因素方差分析，Plt;0.05为差异有统计学意义。 2结果 2.1血清生化指标与细胞因子水平 术后1周CsA组及大黃酸组血清ALT、AST、TNF?alpha;、IL?2和IFN-gamma; 水平均低于对照组(Plt;0.05), CsA组与大黄酸组上述指标比较无统计学差异 (Pgt;0.05),见表 1。 表1 各组血清ALT、AST、组别 ALT (U/L) ASTTNF 表1 各组血清ALT、AST、 组别 ALT (U/L) AST IFN-gamma; (pg/mL) 对照组 589 对照组 589plusmn;42 749plusmn;98 79plusmn;8 150plusmn;2786 150plusmn;27 86plusmn;7 CsA 组 CsA 组 321plusmn;52* 406plusmn;62* 46plusmn;9* 80plusmn;22*50 80plusmn;2