河南科技大学遗传学课件第五章 DNA的损伤、修复和基因突变课程实例.ppt

4. 嵌入染料（intercalated dye）对DNA的损伤 吖啶橙 (Acridine Orange，AO) 溴化乙锭 (Ethidium Bromide，EB ) 扁平染料分子 结果产生－－移码突变 第二节 DNA的修复 一、DNA修复的概念 二、直接修复（损伤逆转） 三、切除修复 四、错配修复 五、重组修复 六、易错修复和SOS反应 Welcome to Molecular Biology 一、DNA修复的概念 修复(DNA Repair)是指在DNA损伤时，在多种酶的作用下，细胞对损伤的反应。 ● 切除修复（excision repairing，ER） ● 错配修复(mismatch repair，MMR) ● 直接修复（direct repair） ● 重组修复(recombination repair) ● 易错修复（SOS修复） 二、直接修复（损伤逆转） 直接修复（direct repair）是把被损伤的碱基回复到原来状态的一种修复。 有以下三种方式： ● 光修复（light repair） ● 烷基转移酶直接修复 ● 单链断裂修复 （1）光修复（light repair） (2) 烷基转移酶（Alkyltransferases）直接修复 (3) 单链断裂修复 三、切除修复（excision repairing） 在DNA复制之前，在一系列酶的作用下，将DNA分子中受损伤的部分切除后，以另一条完整的链为模板，合成出切除部分，从而恢复DNA正常结构的过程。 包括： ● 碱基的切除修复（BER） ● 核苷酸的切除修复（NER） 1. 碱基切除修复(Base excision repair、BER) 主要修复单个碱基缺陷的损伤。 ● 短-补丁修复（short-patch repair） ● 长-补丁修复（long-patch repair） 碱基切除修复（BER）途径中的重要糖苷酶： ● 尿嘧啶-N-糖苷酶，从DNA中除去尿嘧啶碱基； ● 次黄嘌呤-N-糖苷酶，从DNA中除去腺嘌呤脱氨后形成的次黄嘌呤； ● 3—甲基腺嘌呤DNA糖苷酶，可修复烷化剂产生的损伤。 2. 核苷酸片段切除修复(Nucleotide excision repair，NER) DNA螺旋结构有较大损伤变形时，则以核苷酸切除修复方式进行修复。 原核生物DNA损伤切除修复过程： 原核细胞NER系统蛋白质和酶的功能 连接切口 DNA连接酶 填补缺口 DNA polI/II 解链酶 UvrD 在损伤部位的5-端切开DNA链 UvrC 识别损伤并在3-端切开DNA链 UvrB 识别损伤并充当分子接头 UvrA 功能 蛋白质 ● 着色性干皮病（Xeroderma pigmentosum，XP）是一种切除修复酶的缺陷。 ● 患者对日光或紫外线特别敏感，对紫外线引起的DNA损伤不能修复，容易诱发皮肤癌。 ● 至少有7种不同基因的缺陷可导致XP。 四、错配修复(Mismatch repair，MMR) 负责修复DNA复制过程中由于错误掺入而产生的错配。 (1) 识别错配的碱基对。 (2) 对错配的一对碱基要能准确区别哪一个是错的，哪一个是对的。 (3) 切除错误的碱基，并进行修复合成。 错配修复过程： 昂贵的代价用于保证DNA的准确性。 五、重组修复(recombination repair) 重组修复过程： ● 重组修复不能完全去除损伤，损伤的DNA片段仍然保留在亲代DNA链上，只是重组修复后合成的DNA分子是不带有损伤的。 ● 但经多次复制后，损伤就被“稀释”了，在子代细胞中只有一个细胞是带有损伤DNA的。 ● 重组修复机制的缺陷,有可能导致肿瘤（乳腺癌）发生。 六、易错修复和SOS反应 SOS反应( SOS response)是细胞DNA受到损伤或复制系统受到抑制的紧急情况下，细胞为求生存而产生的一种应急反应。 SOS反应诱导的修复系统包括： ●避免差错的修复（error free repair）：错配修复、直接修复、切除修复和重组修复。 ●易产生差错的修复（error prone repair）：易错修复（SOS修复）。DNA聚合酶Ⅳ和Ⅴ。 SOS反应： 0期：还没有出现SOS应答，MMR（错配修复）。 1期：NER（核苷酸片段切除修复）。 2期：重组修复，主要是针对DNA双链断裂的修复。 3期：SOS修复（易错修复）。 4期：凋亡。 * 第5章 DN