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独创性声明
本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他
人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得安徽农业大学或其它教育机构
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的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均
己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。
研究生签名 靼 时间:垆¥年加哆日
关于论文使用授权的说明
本人完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权 保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或 扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意安徽农业大学可以用不同方式在不同 媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。
(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)
研究生签名 壮 时间:沙V r ,)
年汐月够日
导师签名 垩幽 时间:删年 如叼门
摘要通过对安徽省瓜萎炭疽病标样的采集,经过室内分离、纯化培养得到8个菌株,
摘要
通过对安徽省瓜萎炭疽病标样的采集,经过室内分离、纯化培养得到8个菌株, 然后采用同工酶电泳技术对分离到的8个瓜萎炭疽菌菌株进行辅助分类与鉴定,详细 研究了各种环境因子和营养物质对瓜蒌炭疽菌生长的影响及其分泌的胞外酶种类和 活性,并对该病的化学和生物防治效果进行了探讨。本论文的主要研究结果包括: l瓜蒌炭疽病病原菌的鉴定
根据形态特征、培养性状、致病力及寄主范围的测定结果,按照sunon的分类系 统分种检索,将引起安徽省瓜葵炭疽病的病原菌初步鉴定为CD肥fD护jc^”m D,6如“^删
分离到的8个菌株间在PDA培养基上的培养性状存在差异。
分离到的8个瓜萎炭疽菌菌株对瓜萎的致病力表现出一定的差异。其中s5致病 力最强。S9的致病力次之,其余的6个菌株通过Duncajl’s新复极差测验显示致病力 间无显著差异。未针刺处理组未发病,可能由于瓜蒌果实表皮较厚而无法造成有效侵 染。
瓜萎炭疽菌在人工创伤接种条件下能够侵染包括珙桐科、木兰科、大麻科、葫芦 科、悬铃木科、黄杨科、桑科、旋花科、蔷薇科、茄科等10科13种植物。 2瓜蒌炭疽菌生理生态的研究
2.1瓜蒌炭疽菌越冬能力
病原菌在0℃~15℃范围内的病菌均可安全越冬。.5℃中未能分离出瓜蒌炭疽菌。 在土壤含水量为O.25%范围时,病菌均能安全越冬。瓜萎炭疽菌在种子内部和种子表 面均能安全越冬。瓜萎病果、病叶、病种子等是引起田间发病的主要初侵染来源,且 对越冬条件要求不严格。
2.2环境园子对瓜萎炭疽菌的影响 瓜萎炭疽菌菌丝生长适温在21℃.30℃之间,其中以28℃最适菌丝生长。低温对
菌丝无致死作用,只能抑制其生长,恢复常温后菌丝仍具生长能力,而高温则可丧失
菌丝的生活力。孢子在10℃以下和40℃时均不能萌发,而在15℃-36℃之间均可萌发, 且孢子萌发率差异不显著,均在96%以上。
各菌株在RH50%一100%范围中,菌落速率差异不显著。在不同的RH条件下炭
疽菌分生孢子萌发率均较高(70%),差异不显著。 在PDA中培养时,各菌株在pH4.12之间均可生长,以pH5时菌落直径最大。
从各菌株液体培养的菌丝干重来看,以pH5.7菌丝干重处于高峰值,为生长的最适范 围。各菌株在pH4.11之间的孢子萌发率差异不显著,从pHlO开始逐渐下降,到pHl2 时孢子几乎不萌发。
各菌株在不同的光照条件下的菌落直径差异不显著,说明瓜篓炭疽菌菌丝生长对
光照条件要求不严格。2.3营养物质对瓜蒌炭疽菌的影响
光照条件要求不严格。
2.3营养物质对瓜蒌炭疽菌的影响 加入碳源促进各菌株的生长。但瓜萎炭疽菌对不同碳源的利用程度不同。其中对
葡萄糖、果糖和蔗糖的利用率最大,而对淀粉、甘露醇、半乳糖的利用较差,对乳糖
几乎不能利用。各菌株在不同碳源和对照培养基上的孢子萌发率均较高,差异不显著。 瓜蒌炭疽菌对有机氮中各类氨基酸(精氨酸、赖氨酸除外)、牛肉浸膏、酵母浸 汁和无机氮中的硝态氮利用较好,对无机氮中的铵态和亚硝酸态氮几乎不能利用。对
有机氮中的尿素的利用率还有待研究,因为同对照相比,尿素在平板中培养时的菌落 直径很小,但在液体培养时菌丝干重较重,两者差异很大。
不同生长因子(维生素)对炭疽菌菌丝生长有一定的影响,但促进作用不很明显, 仅VB6作用后,菌落直径同对照组一样,其余各种维生素对菌丝生长促进作用不大。 各种维生素的不同浓度之间对菌丝生长也存在着差异。以3 u g/ml对炭疽菌的生长促 进作用最大。维生素对瓜蒌炭疽菌的具体作用还不明确。
2.4培养基优化的研究
采用二次通用旋转组合设计方法对瓜萎炭疽菌菌株sl和s9的培养基最佳组合进 行了研究,建立了具有较好预测性能的培养基反应模型,并用试验数据验证了该模型 的可靠性。利用
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