高地芽孢杆菌PY41碱性蛋白酶纯化.pdfVIP

0914ls05-13 38 粮食与油脂 2014 年第 27 卷第 5 期 高地芽孢杆菌PY41 碱性蛋白酶纯化 1 1 1 2 李　文 ，陈复生 ，丁长河 ，李盘欣 （1. 河南工业大学粮油食品学院，　河南郑州　450001； 2. 河南南街村集团有限公司技术中心，　河南漯河　462699 ） 摘　要：该文对高地芽孢杆菌（Bacillus altitudinis ）PY41 菌株的碱性蛋白酶进行了分离纯化，并对 其酶学性质进行了研究。通过硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤层析和疏水层析得到纯化的碱性蛋白酶， 经 SDS–PAGE 凝胶电泳检测得到该蛋白酶相对分子质量为 29.5 kDa。 关键词：高地芽孢杆菌；碱性蛋白酶；纯化 Separation and purification of alkaline protease from Bacillus altitudinis PY41 1 1 1 2 LI Wen ，CHEN Fu-sheng ，DING Chang-he ，LI Pan-xin （1. College of Food Science and Technology，Henan University of Technology ，Zhengzhou 450001 ，Henan ，China ； 2. Technology Center ，Henan Nanjie Limited Company ，Luohe 462699 ，Henan ，China ） Abstract ：To purify alkaline protease of Bacillus altitudinis PY41 ，and study its properties. By using (NH4)2SO4 segmentation precipitation ，Sepharose CL–6B and Phenyl Sepharoses to purify the alkaline protease of Bacillus altitudinis PY41 ，the protease was determined by SDS–PAGE to have a molecular weight of 29.5 kDa. Key words ： Bacillus altitudinis ；alkaline protease；purification 中图分类号：TS201.2＋5 文献标识码：A 文章编号：1008―9578（2014）05―0038―03 〔5〕 微生物来源的碱性蛋白酶大多是胞外酶，与动、植 糖 40、CaCl 0.7、KCl 0.3、MgSO ·7H O 0.2、pH 10 ； 2 4 2 物来源的蛋白酶相比具有价格低廉、来源广、菌体易于 Sepharose CL–6B 凝胶层析洗脱液：0.05 mol/L 硼酸 培养、产量高、高产菌株选育简单、快速优点，具备动植