海洋真菌活性代谢产物的分析-微生物学专业论文.docxVIP

复旦大学硕十学位论文 复旦大学硕十学位论文 海洋真菌活性代谢产物的研究 海洋真菌活性代谢产物的研究 摘要 海洋真菌是潜在的具有多种生物活性的次级代谢物的来源，代表了寻找新 的海洋药物的方向。本文用稻瘟霉分生孢子和菌丝体形态变化为指标的生物筛 选模型，从海洋真菌的代谢产物中筛选抗真菌和抗肿瘤活性化台物。通过对海 洋来源的真菌样品进行稻瘟霉的生物活性的筛选获得活性菌株，并采用多种层 析分离手段进行活性代谢产物的跟踪分离获得活性代谢单体化合物10个，应用 现代波谱技术鉴定了其中6个单体化合物。 所鉴定的海洋真菌代谢产物包括来源于海洋活性菌株09．1．1．1的化合物 stefigmatocystin(FM-I)和averantin(FM-2)、来源于活性菌株08-2—414的 pyrenocine A(FM-3)和paxilline(FM-4)、来源于活性菌株1 0-25—28—1的 X28A(FM-5)以及来源于海洋真菌样品96F209的emodin(FM-7)。其中化合物 X28A(FM-S)的结构骨架罕见于次级代谢物，其余化合物均为首次分离自海洋 真菌的代谢产物。 化合物VM-1与FM-2在土壤菌株Aspergitlus parasiticus的真菌毒素的生 物合成路径中处于相应的位置，当两个化合物从海洋真菌的代谢产物中同时分 离得到时，说明两者在海洋真菌09—1．1．1的生物合成路径中存在渊源。植物毒 素FM-3与FM．4来源于同一活性海洋真菌代谢物中，FM-3结构简单，生物碱 FM一4结构复杂，在生物合成途径上有进一步研究的意义。化合物FM-5具有独 特的结构单元组合，由嘧啶酮与核糖糖苷骨架构成，具有这种结构骨架的化合 物罕见于次级代谢物，其生物渊源以及化合物的新颖性有待于深入研究得到阐 明． 稻瘟霉生物活性筛选显示，代谢产物FM-1至FM-10对稻瘟霉菌丝生长的 最小抑制浓度分别为12．5、1．6、1．6、3．1、N、5．0、2．5、12．5、6．3和3．1pg／mL， 用稻瘟霉活性筛选体系跟踪分离到的真菌代谢产物在抗真菌以及相关药理活性 测试中保持有很好的一致性。 本课题采用稻瘟霉生物活性模型跟踪分离海洋真菌活性代谢产物，结果表 明该初筛体系灵敏、方便、迅速、成本低且相关性好，能有效的指导活性代谢 产物的分离，海洋真菌的生物活性物质的研究将为发现新的药物研究的先导化 合提供重要有效的天然资源。 关键词：海洋真菌，代谢产物，稻瘟霉 复旦大学硕士学位论文 复旦大学硕士学位论文 海洋真菌活性代谢产物的电阡究 Studies on the Bioactive Metabolites ofMarine Fungi ABSTRACT Marine fungi are potentially prolific sources of highly bioactive secondary metabolites that might represent useful leads in the development of new pharmaceutical agent．We apply new screening bioassay detecting deformation of mycelia germinated from eonidia of PWicularia oryzae P一2b to screening novel antifungal and antineoplastic metabolites from the broth of marine—derived fungus． From 141 samples collected at Okinawa Island tested by this screening method，we got 8 active strains from which we isolated and purified 1 0 active metaholites by bioactivity—guided fractionation using modem chromatography technology．On the basis of chemical and spectral analysis，especially by 2DNMR spectra,the structures of6 metabolites have been elucidated． The bioactive metabolites isolated from the culture broth of marine fungus and elucidated by 1D and 2D NMR techniqu