课件：李斯特菌的检验.ppt

一种添加了半胱氨酸和蛋氨酸的HTM培养基 2019 - * LM的实验室检测方法 数值分类鉴定和新型计数技术 最常用且普遍被认可的是API-Listeria test。共包括10个生化反应，通过查询代码表可以对LM和李斯特属内的菌作快速鉴定。 传统的计数以平板计数和MPN两种方法为主。现在有一种经过改良的疏水网膜（HGMF）技术适用于好氧菌计数，它采用的ISO-GRIO系统，具有1600个小方格的网膜，能浓缩样品细菌，除去抑制物，同时利于细菌在培养基间转移时活力的恢复。 2019 - * LM的实验室检测方法 1987年首先报道了针对LM鞭毛抗原的单克隆抗体ELISA检验程序，可以在2~3d内从污染样品中检出LM。 1992年以特异的单克隆抗体建立的夹心ELISA方法能于20~24h内检出8~10cfu/g，第一次做到以免疫学方法把LM与非病原性李斯特菌分开。 2004年报道了以免疫为基础的生物传感器可以在24h内检测10~100cfu/g样品。 2019 - * LM的实验室检测方法 其它以抗原-抗体反应为基础的免疫学方法： 免疫胶体金技术 免疫磁珠分离菌体和核酸提纯技术 免疫磁珠PCR技术 酶免疫发光技术 2019 - * 快速检测 商品化的用于食品标本中快速检测李斯特菌属的增菌肉汤都是基于免疫学原理的，应用单克隆抗体（比利时Organon-Teknika生产的Listeria-Tek）、Listeria免疫试剂盒（法国Transia产品）、VIDAS-LMO（法国生物梅里埃产品）、Listeria（英国Oxoid产品）这些方法具有属特异性，Lister test（VICAM，watertown，Mass.）及单核细胞增生性李斯特菌DNA探针（Gene-Tank，Framingham，Mass）有种特异性。这些试剂盒不是为了临床标本的检验诊断或治疗而设计的。 脑脊液中及组织中单核细胞增生性李斯特菌的DNA能以PCR方法检测。应该在专门的实验室中操作，方法的敏感性、特异性高，当抗生素的使用影响细菌的分离时尤其有用。 2019 - * 流行病学 LM的易感对象重点以孕妇为主，也有新生儿脑膜炎病例和免疫力低下的全身（中枢）或局部症状发病报道。 由于该菌可通过眼及破损皮肤、粘膜进入体内而造成感染，性接触也是一种潜在的传播途径。 2019 - * 流行病学 食源性病例可以是散发或暴发流行，主要传播媒介是污染的食品，也有与食品无关的类似医院内的暴发，主要发生在托儿所。在部分国家，其发病率为0.5~0.8例/10万人。 发病机理和体液免疫的作用尚不清楚。 2019 - * 致病性 LM进入人体后发病与否和宿主的年龄及免疫状态有关，该菌是一种细胞内寄生菌，宿主对其的清除主要依赖细胞免疫机制。 2019 - * 发病机制 LM由寄生物介导的细胞内增殖，使它附着及进入肠细胞粘膜与巨细胞吞噬系统； 抗活化的巨噬细胞，LM有细菌性过氧化物歧化酶，可使它抗活化巨噬细胞内过氧化物（杀菌的毒性游离基团）分解作用。 溶血素O，可以从培养物上清夜中获得，有α 和?两种，为毒力因子。 2019 - * LM的毒力因子 李斯特菌溶解素（LLO）： 系由hly基因编码的Hly蛋白，是一种孔形成毒素，与破坏吞噬体，促进菌体进入胞液有关，是主要的毒力因子。 ActA蛋白 磷脂酶C P60蛋白 2019 - * LM的毒力因子 PrfA蛋白 内化素 表面蛋白P104： 除了内化素外，LM另一种表面蛋白P104也已被证实对于肠道细胞的粘附非常重要。 2019 - * 临床表现 LM有嗜神经性质，所以患者表现以神经症状最为明显。其中以李斯特性脑膜炎，神经系统性李斯特病、败血症、脓毒血症最为凶险，表现为起病急剧，发热（39℃以上），意识障碍、昏迷、肢体麻痹以及小脑功能障碍。病人即使幸免遇难，也常常留下共济失调、失语、眼球麻痹、肢体瘫痪等后遗症。病死率达20~30%，使用抗生素治疗可降低病死率。 2019 - * 临床表现 感染LM的孕妇多表现有宫内感染并可发生早产、流产、死胎，预后险恶。产下的婴儿常在24~72h内死亡。 有时可侵犯上呼吸道而呈现咽峡炎的症状，常伴有局部淋巴腺炎。 可引起人的心内膜炎，并可感染皮肤、眼睛、泌尿道而引起皮肤损伤、结膜炎、尿道炎等症状。 2019 - * 临床表现 人和动物感染LM时，以血中单核细胞明显增多为重要特征，为此以前人们误以为本菌是传染性单核细胞增多症的病原菌。 发生LM的脑膜炎时，脑脊液的单核细胞和中型粒细胞极度增多，糖下降而蛋白升高。 LM脑膜炎的临床症状的多样性和血清检测无严格的特异性，为本病的诊断带来一定困难，本病确诊依赖细菌培养。 2019 - * 预防和干预措施 LM在食品的一般热加工处理中能存活，