关节骨软骨急性损伤的修复整合研究-外科学(骨科专业)专业论文.docxVIP

上海第二嗽科犬学2000级博士论文英文缩略词一览表 上海第二嗽科犬学2000级博士论文 英文缩略词一览表 }{器 Haematoxylin ard eosin 苏拳赣参盔染夔 {GF一王 Insulintike growth factor-·l 蔟鸯素弹垒长嚣予一l TGF—S Transforming growth factor-§ 转往生长匿予-叠 EDtA Ethylenediaminetetraa eerie acid 乙二胺西乙酸 BMSCS Bone marrow stem cells 骨髓干细胞 PBS Phophate-．buffered saline 磷酸盐缓冲液 TEM Transmission electron microscopy透射屯镜 PG Proteoglycan 蛋白多糖 8艇嚣M Alpha-modified Eagle’S medium a改襄伊播尔培养基 FBS Fetal bovine serum 踉孛盎薅 Ee量《 ExtraeeIIutar matrix 绥藏癸基蒺 爵AG Glyeosamin。g{yc8n 蘩糖胺聚禧 OATS Osteochondral autowtransplantation system 自体骨软骨移植系统 2 上海第二医科大学2000级博士论文关节骨软骨急性损揍的修复整合磷究 上海第二医科大学2000级博士论文 关节骨软骨急性损揍的修复整合磷究 博士研究生 李文辉 导 师侯筱魁 中文摘要 研究目的：关节骨软骨急性损伤是l隘床常见疾病，软骨组织自囊 修复栽力低下，治疗缺乏有效手段，容易导致截伤佳关节炎和功能障 碍，严匿影响了人们的生活质凰，同时给社会和家庭造成了极大经济 负担。随罄生物学驰楗蚪科学黪避展，治疗观念的转变葺瑟手术器械的 箭新，为关节骨软骨急往损伤修复掇供了新的方法，有望解决这一难 题。本实验用兔急性嚣软骨缺损实验模型，体外培葵扩增鬓体骨燧攀 痰干缨轭(BMSCs)，复合藻馥钙及生长因子移植修复股骨内髁负蘑缺 损区，观察其修复过程，以期罨找一种适合临床应用的关节骨软母急 性损伤的修复方法。 方法：实验分为园部分： 第一部分：动物缺撰模型的建立及检测 遥桶新西兰大自兔铡作膝关节内髁负冀区骨软骨缺损模型，分期 取材行大体观察和HE及甲苯胺蓝染色，观察修复缀缎性质，判羧其 是否符合实验簧求。 第二部分：骨馓基质干细胞的体外壤养及与藻酸锊复合壤券懿戏 察 骨髓中含有少量的多能蘩质干细胞，能向成软骨细胞署Ⅱ成骨细胞 等转化，它的存在为毋软骨组织豹损伤掇供了潜在的修复靛力。 BMSCs的含量并不丰富，每10万个有核细胞中才有1个，因此将其 在体外培养扩增就显季导尤为重要。域体材料是种子缨您生长微环境静 蓬要缀戒部分，箕性能对BMSCs增精、分化及表型维持有着重要影 响a本部分拟通过体外细胞扩增培养方法将BMSCs鱼骨髓中分离并 燃以扩增，复仑藻酸钙螽彤戏凝珠，在俸外培养条件下观察箕增殖及 生长特性。 圭塑苎三墨型查堂!!!!堡堂主堡塞——第三熬努：复合零葶辩俸痰试验 圭塑苎三墨型查堂!!!!堡堂主堡塞—— 第三熬努：复合零葶辩俸痰试验 以可注射性藻酸钙凝胶作为细胞载体，将体外扩增的BMSCs和 生长因子IGF—I、TGF，B分为五种组合：①藻酸钙、③藻酸钙+自体 MSCs、③藻酸钙+自体MSCs+IGF．I、④藻酸钙+自体MSCs+TGF一8、 ⑤滚黢锈+鑫俸MSCs+TGF．§+IGF．1，注射于鑫俸瑟舞兰窦兔皮下， 并对所形成的组织进行形态学蕊察，戳逡择最佳豹组合方式。 第四部分：兔滕必节骨软骨缺损修复 本部分用体外培养扩增自体BMSCs复合藻酸钙及嫩长因子移植 修笈兔藤关节般嚣蠹秣受羹区上款霉软骨缺损，分三个fl重鼹段鼹察其 修笈情况，班襄寻我一释适合法寨痘髑的鸯软骨损伤修复方法。 结果：1．兔膝关节股骨髁负重区赢径3mm、深度3ram的急性缺 损不能自身满意修复，为纤维组织充填。 2，BMSCs与藻酸钙复合培莽爱，缨藏能傈持正常形态，且与穆精 复合蓬好，著发凌缨溅活性较高，臻戆释盛。 3，藻酸钙凝胶复食BMSCs及IGF-I和TGF．B能在皮下分化为软 骨细胞和成骨细胞，膨成成熟软骨组织，逐渐转化为骨组织并最终被 吸收，无免疫排斥反戚及毒性反应。 4。本实验在逢艘荚繁夤簌嚣浚猴螽疆入套薅BMSCs+藻酸钙 +IGF—I+TGF—B复合体，术后观察至12周。结果发现所裙实验区的修 复组织表面光滑，各期较对照组修复均商统计学意义泸(0．05)。 缡论：l。兔膝关节负重区直径3mm、深度3ram的怨性缺损能满 足零实验黪凌携设诗簧袋。 2．BMSCs在藻酸钙凝胶中能保持疆常形态、较高活性、旺盛功能， 且与树料复合良好，能分化为软骨细胞和成骨细胞，