光化学法灭活红细胞制品中的病毒及相关机理的研究-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

中nn,10,tm医科大学博士掌位论文英文缩略语 中nn,10,tm医科大学博士掌位论文 英文缩略语 ATP ade rioSine一5’一triphoSphate bp base pair BVDV bovine vi FU S diarrhea viruS CMV cytomegalovi rus CTP cYtidine一5’一triphOSphate DAT direct anti 910buli rl test DEAE di ethylamj rioethyl DEPC di ethylPYrocarbonate D～tMB 1．9-dimethYlmethYl elle b1Ue I)NA deoxyri b0 rlucl ei c aCid 1．3一DPG 1，3一diphosphoglycerate 2，3-DPG 2，3-diphoSph091 Ycerate EB ethidium bromide EDTA ethylene di o．mitietetraaceti C aCid GAPD 91yceral dehYde-3一phosphate dehydrogenase GTP guanositie一5’一triphoSphate Hb hem0910bi n ftct hematocri t HIV human immunodefi cie ElcY Virus HSV herpes Simplex virus HTLV human T一1 ymphottopi c Virus IgG immunoglobUl i13 G kb ki】0base LB Luria broth MB methYlene b1 Ue NtLDtt rI．iCOtinami de adeni rte ditlLtCleotide (reduced form) P13S phosphate—bu ffel7ed sal i tie pfu plaque—foFmi ng urlite 3一PG 3-phoSph091 YCerate 中田协和医科大掌博士掌位论文PGK 中田协和医科大掌博士掌位论文 PGK phosphogl ycerate kinase PRV Pseudorabi es virus PVC p01YvinYl chl ori de RBC red blood Cell RNA ribonucl ei c 8ci d RNase ribonucl e8se RT—PCR reverse transcript polymerase chai n reaction TBE Tri s／borate electrophoresi s(buffer) TCA tri chloroacetiC aci d Tri S tri s(hydroxymethyl)8111i nomethane UTP uri dine一5’一triphosphate UV ultr8viol et VSV vesicUlar stomatiti s virus “ 》 ．2． 中田协和医科大掌博士掌位论文中文摘要 中田协和医科大掌博士掌位论文 中文摘要 光化学法灭活红细胞制品中的病毒及相关机理的研究 为了找到一种能用于红细胞病毒灭活的新的吩噻嗪类光 敏剂 我们筛选了一系列吩噻嗪类化合物，对它们的构效关 系进行了探讨。在筛选的新光敏剂中，M007是最好的一个。 与已经被用于红细胞病毒灭活研究的MB和DMMB相比，它对 红细胞的损伤小于MB，与DMMB相当；在病毒灭活稳定性方面， M007优予DMMB。 以M007为光敏剂，通过正交试验研究了光化学处理中样 品台转数、暗反应时间、红细胞压积和液层厚度4个因素对 灭活病毒和红细胞损伤的影响，并确定了较好的光化学处理 条件。在此条件下，M007光化学处理能有效地灭活所使用的 模型病毒，灭活6．2±O．3 Logl0 Phi6噬菌体，6．5±0．6 L0910 VSV，5．3±O．5 Logl 0 HSv．1，9．9±0．4 L0910 R-17噬菌体。I 为了减少M007光化学处理对红细胞的损伤，笔者对保存 液配方进行了研究和改进。在改进的新配方中，病毒灭活效 果没有明显改变，但红细胞溶血比在原配方中减少了一半， 形态学指数也好于原配方，保存末期2，3-DP6虽然低于原配 方，但也高于对照，其他各项指标未受影响。 了对吩噻嗪类光敏剂灭活病毒的机理与靶点有所了 们研究了羟自由基猝灭剂(一类猝灭剂)和单线态氧 猝灭剂(二类猝灭剂)对DMMB、M007灭活病毒和损伤红细胞 的影响，以及D删}B、M007灭活VSV的靶点。结果显示单线态 氧猝灭剂可以明显抑制DMMB和M007光化学灭活Phi6噬菌体 的