第11章色谱全面分析概论和经典液相色谱.pptVIP

第十一章 色谱分析概论 和经典液相色谱 第一节 色谱法概述 一、色谱法的由来 1．1906年由俄国植物学家Tsweet创立 植物色素分离 2．现在：一种重要的分离、分析技术 分离混合物各组分并加以分析 固定相——除了固体，还可以是液体 流动相——液体或气体 色谱柱——各种材质和尺寸 被分离组分——不再仅局限于有色物质 图示 固定相——CaCO3颗粒 流动相——石油醚 色带 二、色谱法定义、实质和目的 定义：利用物质的物理化学性质建立的分离、分析 方法 实质：分离 目的：定性分析或定量分析 三、分类： 1．按两相分子的聚集状态分： 流动相 固定相 类型 液相色谱 液体 固体 液-固色谱 液体 液体 液-液色谱 气体 固体 气-固色谱 气体 液体 气-液色谱 气相色谱 续前 2．按固定相的固定方式分： 3．按分离机制分： 平面色谱 纸色谱 薄层色谱 高分子薄膜色谱 柱色谱 填充柱色谱 毛细管柱色谱 分配色谱：利用分配系数的不同 吸附色谱：利用物理吸附性能的差异 离子交换色谱：利用离子交换原理 空间排阻色谱：利用排阻作用力的不同 图示 色谱法简单分类 四、色谱法的特点 优点：“三高”、“一快”、“一广” 缺点： 高选择性——可将性质相似的组分分开 高效能——反复多次利用组分性质的差异 产生很好分离效果 高灵敏度——10-11~10-13g，适于痕量分析 分析速度快——几~几十分钟完成分离 一次 可以测多种样品 应用范围广——气体，液体、固体物质 化学衍生化再色谱分离、分析 对未知物分析的定性专属性差 需要与其他分析方法联用(GC-MS,LC-MS) 第二节 色谱法的原理 一、色谱过程、分离原理及特点 二、基本类型色谱法的分离机制 三、分配系数与保留行为的关系 一、色谱过程、分离原理及特点 （一）色谱过程 指被分离组分在两相中的“分配”平衡过程 以吸附色谱为例 吸附→ 解吸→再吸附 →再解吸 →反复多次洗脱→被测组分分配系数不同→ 差速迁移 → 分离 图示 分配系数的微小差异→吸附能力的微小差异 微小差异积累→较大差异→吸附能力弱的组分先流出； 吸附能力强的组分后流出 续前 （二）色谱分离原理 色谱分离基于各组分在两相之间平衡分配的差异， 平衡分配可以用分配系数和分配比来衡量 （三）色谱分离特点 1．不同组分通过色谱柱时的迁移速度不等 →提供了分离的可能性 2．各组分沿柱子扩散分布→峰宽↑ →不利于不同组分分离 二、基本类型色谱法的分离机制 基本概念：固定相（s）；流动相（m） （一）吸附色谱法 （二）分配色谱法 （三）离子交换色谱法 （四）空间排阻色谱法 （一）吸附色谱法 要求： 固定相→吸附剂（硅胶或AL2O3） 具表面活性吸附中心 分离机制： 吸附系数 注：Ka与组分的性质、吸附剂的活性、流动相的性质 及温度有关 吸附平衡 Xm + nYa→Xa + nYm 图示 分离机制： 各组分与流动相分子争夺吸附剂表面活性中心 利用吸附剂对不同组分的吸附能力差异而实现分离 吸附→解吸→再吸附→再解吸→无数次洗脱→分开 （二）分配色谱法 要求： 固定相→机械吸附在惰性载体上的液体 流动相→必须与固定相不为互溶 载体→惰性，性质稳定， 不与固定相和流动相发生化学反应 分离机制 狭义分配系数 注：K与组分的性质、流动相的性质、固