二吡咯亚甲基染料类单糖荧光探针的合成与性能-应用化学.PDF

第３１卷 第１２期 应 用 化 学 Ｖｏｌ．３１Ｉｓｓ．１２ ２０１４年１２月 　　　　　　　ＣＨＩＮＥＳＥＪＯＵＲＮＡＬＯＦＡＰＰＬＩＥＤＣＨＥＭＩＳＴＲＹ　　　　　　　 Ｄｅｃ．２０１４ 中位取代苯硼酸的含稠合外环的硼二吡咯亚甲基 染料类单糖荧光探针的合成与性能  徐海云 　刘起峰　宋胜梅 （商丘师范学院化学化工学院　商丘４７６０００） 摘　要　以环己烯为起始原料，首先经过两步改进的合成方法制备出２乙氧羰基３，４四亚甲基吡咯，并用过 量氢化铝锂将其高温还原得到２甲基３，４四亚甲基吡咯，后者与被保护的４甲醛基苯硼酸在三氟乙酸的催 化作用下发生缩合反应，用２，３二氯５，６二氰基１，４苯醌 （ＤＤＱ）氧化并依次用三乙胺和三氟化硼乙醚处 理后，得到一种新型的中位取代苯硼酸的含稠合外环的硼二吡咯亚甲基类 （ＢＤＰ）染料衍生物。通过紫外 可见吸收光谱及荧光光谱滴定方法，研究了该染料在特定ｐＨ值下对Ｄ果糖、Ｄ半乳糖、Ｄ葡萄糖等３种单糖 的响应能力，上述３种单糖与ＢＤＰ染料衍生物的键合既表现在吸收光谱上，也表现在荧光发射光谱上，并且 通过对荧光滴定数据的非线性拟合分析，ＢＤＰ染料衍生物１与Ｄ果糖、Ｄ半乳糖、Ｄ葡萄糖的结合常数分别 为１０４５、４４５和１３０Ｌ／ｍｏｌ。因此该染料衍生物作为单糖的荧光探针，具有灵敏度高、选择性较好等优点；另 外，还初步探讨了该荧光探针的传感机理。 关键词　硼二吡咯亚甲基染料，荧光探针，单糖，稠合外环，苯硼酸 中图分类号：Ｏ６２３　　　　　文献标识码：Ａ　　　　　文章编号：１００００５１８（２０１４）１２１４０５０８ ＤＯＩ：１０．３７２４／ＳＰ．Ｊ．１０９５．２０１４．３０５９１ 糖是除蛋白质、核酸之外的第三类涉及生命活动本质的主要生物大分子之一，是维持生命正常运转 的重要物质基础，甚至某些疾病的发生、发展过程都涉及糖的参与。因此，糖的识别和检测对医学、细胞 生物学等领域的发展具有重要意义［１］。在糖的检测方法中，使用最多的酶检测法是葡萄糖氧化酶法和 己糖激酶法，其中葡萄糖氧化酶法（ＧＯＤ）虽然成本低廉、试剂稳定性好、使用广泛，但血液中的还原性 物质会干扰血糖测定；己糖激酶法（ＨＫ）法抗干扰能力强，特异性好，是公认的临床上血糖测定标准方 ［２］ 法，但由于试剂稳定性差，检测成本较高，限制了实际应用 。为克服上述方法的缺陷，在生物医学领 域，荧光生物传感器或化学传感器法已被开发并应用于糖的检测，特别是设计、合成具有高灵敏性、高选 ［３６］ 择性的基于有机荧光染料及硼酸螯合基团的荧光传感器以实现对糖的检测和识别已引起广泛兴趣 。 硼二吡咯亚甲基（ＢＤＰ）类染料作为一种重要的新型荧光标记材料，具有高荧光量子产率和高摩尔消光 系数、良好的光化学稳定性、激发波长位于可见光区、结构易于修饰、发射波长可调变到近红外、不易受 ［７］ 环境和溶液ｐＨ的影响等优点 。因此，近年来通过有效组合ＢＤＰ染料和识别基团来制备所需的各种 荧光探针并研究其应用已经成为国内外十分活跃的研究课题，如通过ＢＤＰ特征光谱的变化，常被用作 ［８］ ［９１０］ ［１１］ ［１２］ 检测质子 、金属离子 、阴离子 以及ＤＮＡ的标记及测序 等。然而，目前基于ＢＤＰ染料的糖类 ［１３］ 荧光分子探针的研究不多 。本文设计合成了一种中位取代苯硼酸基的含稠合外环的ＢＤＰ染料衍生 物１（如Ｓｃｈｅｍｅ１所示），用吸收光谱和荧光光谱研究其与Ｄ葡萄糖、Ｄ果糖、Ｄ半乳糖的结合反应，通 过ＢＤＰ染料衍生物１与单糖结合前后的光谱性质变化来实现对单糖的选择性识别与检测。合成该荧光 探针分子的起始原料价廉易得、合成步骤简单，