过氯酸铵对肺成纤维细胞的纤维化作用-劳动卫生与环境卫生学专业论文.docxVIP

肇中科技大学同济医学院 肇中科技大学同济医学院 硕士研究生沦交 过氯酸镀对臃成纤维细胞的纤维化佟耀 研究生 杨建平 导师 彭开鹿教授 摘要 霹翁：避氯酸铵(妤)楚一种在航天王韭孛被广泛应用斡强氧 化剂，其毒理学作用越来越受到毒理学家的熏视。豳内有人报道 了AP致肺纤维化的病例，但动物试验尚没证实AP的致肺纤维化 作用。本次通过肺成纤维绷脆(FB)体外培养及AP染毒研究，其 蘸豹在予探讨AP豹致脯黪增麓及胶原蛋自会成增加的赫绥维纯 终熙。 f 【试验方法：采用组织块法原代培养小鼠胚胎肺FB，稳定传代 三次后，先以台盼蓝染色确定AP最高作腭浓度600mg／L， 然后在诧浓度下根据需要设50、100、200、500mg／L浓度静染毒 组，同漪设一个弱性对照缀和一个照牲辩照组(虿英染毒)，在对 肺成纤维细胞作用48小时艨，用考马斯亮蓝法测定培养细胞总蛋 囱含量；用MTT(四唑盐)法测爨各组培养细胞的OD值，用以 反跌绥脆的增殖倩况；甭羟脯氨酸试剂盒测定各实验组成纤维细 戆胶原健谢蕊淀；犀样染毒48夺对后，对翳成纤维续貔遴行HE 染色和胶原纤维特殊染色，以观察其形态学变化吖 F 试验结果：结果盟示各染毒组FB细胞的蛋白质含量、OD值、 羟脯氨酸含量与阴性对照组比较差异均笼显著性，岛鼯性对照组 拳中辩技天学嬲滂握拳浆 拳中辩技天学嬲滂握拳浆 矮士磁变生论文 比较∞嬗、羟髓氨酸(HYP)含量差异露显著性(尸O。01)，隧 性对照组oD值、羟脯氨酸含量与阴性对照纽比较楚异有盥著性(户 O．01)。FB纲胞HE染色、特殊染色可见，AP染毒组细胞形态、 大，j、、核浆对魄、胶原纾维密集度、粗纲程度均与黼憔对照缀缨 腿没霄显著性差剃，两辩彀对爨组细胞滕体交大、数毽增多、缨 戆胞浆变得更加丰富，纲胞界限不清，胶溅纤维更加密集、粗大 等纤维优表糯。 结论：脯成纤维缨臆在矗P建接染薄侮磁下，来觅膝成纾维缨 藏增殖帮赫胶氦终维增生等缍维鬣二改变。 关键粥：过氯酸铵 成纤维缀藏 纤缝讫 胶藤纤维 羟脯氨酸 堂皇壁堡叁兰塑递鳖鲎堕 堂皇壁堡叁兰塑递鳖鲎堕 一—————』壁望篷窒茎：i垒曼 The Fibrosis Effect of Ammonium Perchlorate on Pulmonary Fibroblast Postgraduate：Jianping Yang Tutor：Prof．Kaitiang Peng Abstract Objective：Ammonium perchlorate(AP)is widely used as鑫kind of oxidizer in aerospace programs，more and more toxicologists are showing their great concem on its toxicity effect．It WaS reported that the case of pulmonary fibrosis caused by AP in China,but animal trial doesn’t prove the effect．The purpose of this trial is to discuss whether AP causes p醢lmo魏8帮fibroblast proliferation and rise in collagen synthesize of pulmonary fibrosis or not． Methods：Use tissue Masses to primarily culture the lung fibroblast of fetal rats．The detailed process are as follows：After 3 times of embryo fibroblast steadily passage，firstly determining maximum concentration by typan blue staimng，which is 600mg／L。On the basis of this maximum concentration，several treatment groups and tWO control groups were designed：treatment group fibroblast were administered AP with the e雠ee藏镣鲢io|l of50，100，200，500，600 m2鹰，at the same time a negative control group and a positive control group WaS designe