编程性细胞死亡细胞凋亡-生物探索.PPTVIP

1．ced基因 在线虫中已发现14个与细胞凋亡相关的基因。其研究得比较深入的有ced—3和ced-4以及促进细胞凋亡的有关基因。ced-4的详细功能尚不十分清楚，但Ced-3蛋白有530个氨基酸，其中含有约100个氨基酸长度的丝氨酸富含区，提示磷酸化在细胞凋亡中有十分重要的作用。 在哺乳动物中克隆出一个与ced-3相似的基因为白细胞介素1β转化酶(inter-leukin- 1β converting enzyme，ICE)，是一种底物特异性半胱氨酸蛋白酶，可裂解IL-1-β前体为17.5kDa的成熟形式的IL—1β。 由果蝇(D.melanogaster)中克隆出rpr(reaper)基因，编码65个氨基酸的短链多肽，其迅速表达可诱导细胞凋亡，但并非参加一切细胞的凋亡。其在进化中的保守性有待深入研究。 2．rpr基因 它定位于人的第18号染色体，在淋巴瘤中极易发生染色体易位(14：18)，使bcl-2与14号染色体上IgH基因并列而导致过表达。它编码26kDa的Bcl-2a及22kDa的Bcl-2β蛋白。 bcl-2是一个不断在扩增的多基因家族的原型(prototypes)，其在哺乳类中的家族成员有Bcl-χ，Mcl-1，Bax，Bak，Bad，A1和Bik-1。 3．Bcl-2 Bcl-2 —— 229aa构成（鼠236）分在线粒体内膜,细胞内膜表面，内质网，核膜等处 * Bcl-2----B cell lymphoma/leukemia-2 * Bcl-2 和C. elegans 中的ced-9 有很高的同源性，具有促进细胞存活的功能 大量实验证明它是多细胞动物中普遍存在的“长寿”基因，如神经元寿命长，bcl-2的表达则高于其他类型细胞。 *Bcl-2的功能是延长细胞的寿命，而不是刺激细胞的增殖 Bcl-2抗凋亡机制 ①直接的抗氧化 ②抑制线粒体释放促凋亡的蛋白质 ③抑制促凋亡的Bax，Bak细胞毒作用 ④抑制Caspases激活 ⑤维持细胞钙稳态 线虫C.elegans 和哺乳类细胞的死亡途径比较 它是一个多功能的原癌基因，c-myc可促进细胞分裂，参与细胞的转化。c-myc存在于核仁，并可结合在特异的DNA序列上发挥转化因子的作用。它既可诱导细胞凋亡，又可抑制细胞凋亡。 4．c-myc基因 c-myc 转录调节因子 依赖GF Bcl-x Bcl-xl抑凋亡 Bcl-xs促凋亡 p53是肿瘤抑制基因，野生型p53可诱导细胞凋亡。缺乏p53功能的癌细胞若转染p53基因并使其过表达p53时，导致生长抑制。p53诱导细胞周期阻断的能力，长期以来认为其机理是抑制了肿瘤细胞生长，现在认为p53促进细胞凋亡可能是肿瘤生长抑制的主要原因。 5．p53基因 P53-----野生型诱导凋亡，在G1期发挥卡点功能→有缺陷DNA→CIP表达→启动修复→失败→启动凋亡 CIP-----cyclin dependent kinase –interacting protien-1 P53 = molecular policeman? G1 S G2 M Cyclin A+CDK Cyckin A+CDK1 Cyclin B Cyclin D p53 Bax + Bcl-2↓ molecular policeman? Blocking IGF+R Fas和Apo-1是分别从人的T琳巴细胞瘤KT3细胞株及人B细胞淋巴瘤SKW6.4株分离的两个cDNA克隆，序列分析证明两者完全一致，为同一分子。1993年在美国Boston召开的第五届人类白细胞抗原分型国际会议上，正式命名Apo-1／Fas为CD 95。 6．Fas／Apo-1 Fas L(Fas ligand)为人和鼠的Fas的配体。激活的T淋巴细胞高表达Fas L。Fas和Fas L结合则诱导细胞凋亡，但如何激活细胞凋亡的机理尚不清楚。 ICE基因是由哺乳类中克隆出的cdc-3的同源基因，ICE的前体为p45，有p20及p10 2个亚基，p45可能自身参与这一催化过程，(p20～p10)2形成有活性的ICE I。Rat-1细胞中ICE过量表达可导致细胞凋亡，如将ICE的催化位点Cys 285突变，则细胞不能凋亡。 7．ICE基因 细胞凋亡的基因调控 1.线虫细胞凋亡的基因调控 2．果蝇细胞凋亡基因的调控 各种内外信号通过传导汇集于rpr，经过它的整合，调节下游基因的活动，如激活ced3／ICE或抑制ced9，bcl-2则可诱导凋亡 3．哺乳类细胞凋亡的基因调控 (1)Bcl-2、Bcl-2同源蛋白及其结合蛋白：Bcl-2蛋白定位于线粒体、内质网和核膜上，在胚胎组织中广泛表达。