微乳液凝胶固定化脂肪酶催化!-单硬脂酸甘油酯水解反应活性-应用化学.PDF

第; 卷 第 期 应 用 化 学 S34E ; T3E %%/ 年 月 ! ! ! UKVT=R= W)XNT(6 )Y (ZZ6V=[ UK=OVR*N:! ! ! YF\E %%/ 微乳液凝胶固定化脂肪酶催化 !单硬脂酸 ! 甘油酯水解反应活性 ! ! ! 宋少芳 ! 栾玉霞! 路福绥 ! （山东农业大学化学与材料科学学院! 泰安# $%$ ；山东大学药学院药物制剂研究所! 济南） 摘! 要! 以 ’单硬脂酸甘油酯的水解反应为指示反应，初步研究了琥珀酸二辛酯磺酸钠（()* ）’正庚烷’ 明胶 ! 微乳液凝胶固定化脂肪酶在有机相中的水解催化活性。结果表明，明胶和()* 含量、# 值（水与()* 的摩尔 数之比）对酶催化活性均有影响，确定了较佳的凝胶组成：微乳液配比为$（正庚烷）+ $（缓冲液）+ $（()* ）, #- +. + $/ ，明胶质量分数为$#0 ，# 值为# ；当酶含量固定，底物浓度大于%1 $% 2345 6 时，脂肪酶可发挥最大催 化活性；反应时间超过$- 7 ，水解反应达到平衡。 关键词! 微乳液凝胶，固定化脂肪酶，催化活性，水解反应，’单硬脂酸甘油酯 ! 中图分类号：)/8 ；9$-! ! ! ! ! 文献标识码：(! ! ! ! ! 文章编号：$%%%’%-$（%%/ ）%’%$’%- 微乳液是由水、表面活性剂和5 或助表面活性剂、有机溶剂（油）等构成的宏观均匀、微观多相的热 力学稳定体系。低水含量的油包水（I5 ) ）微乳液也叫反胶束。在反胶束体系中，大多数酶能够保持催 ［$ J ; ］ 化活性和稳定性，有的甚至表现出“超活性” 。微乳化技术的出现为酶催化作用应用于酯、肽、糖缩 醛的有机合成、转酯反应、水解反应以及外消旋体的拆分等领域开辟了新的途径。但是随着微乳化技术 ［8 ］ 在实际体系中应用研究的进行，因存在产物不易分离、酶难以重复使用等技术困难而受到限制 。 ［- ］ % 世纪% 年代末，KFL?HM 等 发现I5 ) 微乳液体系可以发生胶凝作用，并对微乳液凝胶的性质进行 ［/ ］ 了初步表征。.% 年代初，NFF@ 等 开始尝试利用这一现象来固定脂肪酶，并对固定化脂肪酶的酶学性 质进行了初步研究；之后，便有利用微乳液凝胶固定化脂肪酶进行有机合成和对映体拆分的研究报 道［# ， ］。微乳液凝胶又称有机凝胶（OP ），目前主要用明胶和琥珀酸二辛酯磺酸钠（()* ）’水’正庚烷 （或异辛烷）微乳液来制备［. ，$% ］。微乳液凝胶固定化酶不但具有含酶微乳液的一些优点，而且在很大程 度上克服了油包水微乳液体系中酶催化生物合成与转化反应中的重要问题，即酶的重复使用和产物分 离。脂肪酶是界面激活水解酶，在水溶液中可催化甘油酯键的水解反应，在非水介质中又可催化酸与醇 的酯合成反应。有关微乳液及其凝胶固定化脂肪酶催化酯合成反应的研究比较深入［$$，$ ］，而对其催化 ［$; ］ 酯水解反应的研究报道不多。KFC@QL32 等 曾研究了微乳液介质中脂肪酶催化布洛芬丙酯的水解反 应，但酯水解反应进行的程度很低；我们也曾研究了脂肪酶在 ()*’正庚烷 I5 ) 微乳液介