(理科选修三)2.2.1动物细胞培养和核移植技术公开课教案编写 .pptVIP

你还在为身体有残疾而苦恼吗？你还在为器官移植找不到合适的供体而焦虑吗？不能在这样下去了，看看我们的体细胞核移植技术吧，只需要从你身上取一个小小的体细胞，通过核移植培养出胚胎干细胞，再用胚胎干细胞诱导分化出各种组织器官，这样的器官的组织相容性抗原跟你的一摸一样，用这样的器官进行器官移植，根本就不会发生免疫排斥。不夸张的说，如果这项技术研究成熟了，以后大家换条胳膊换条腿就跟给汽车换个轮胎一样。你听明白了吗？这不是天方夜谭，巨大的前景就在眼前，你还在等什么？现在，对，就是现在，赶紧加入到生命科学的研究中来吧！ 广而告之： 四、体细胞核移植技术的应用前景 1、加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育 2、保护濒危物种，增加存活数量 3、克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 4、可以作为异种移植的供体，可以用于组织器官的移植 植物组织培养 植物体细胞杂交 1.动物细胞培养 2.动物细胞融合 3.制备单克隆抗体 4.细胞核移植 回顾： 动物细胞工程常用的技术手段： 植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 动物细胞工程的基础 就是从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞然后,放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。 1、动物细胞培养概念： 2、原理： 细胞增殖 定义：人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。 胰蛋白酶处理 取出组织 胚胎或幼龄动物器官组织 剪碎 单个细胞 细胞悬液 转入培养瓶内培养 贴壁生长 接触抑制 ①原代培养 3、过程 原代培养 增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容易培养 去掉组织间 蛋白 加培养液 强调一：细胞贴壁过程 ■细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就 贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 ■培养瓶或培养皿壁要求： 表面光滑、无毒、易于帖附。 ■当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 强调二：接触抑制 细胞的接触抑制 定义： 当原代培养的细胞处于接触抑制后, 用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个过程称传代培养.（分瓶培养的过程） ②传代培养 遗传物质未改变 原代细胞 40—50代细胞(细胞株) 遗传物质己改变 无限传代（细胞系） 分瓶传代培养 胰蛋白酶 原代培养 接触抑制 传代培养 接触抑制 总结：动物细胞培养过程 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 配置细胞悬液 剪碎用胰蛋白酶处理 10代细胞 转入培养瓶 40-50代细胞 传代培养 无限传代 单个细胞 加培养液稀释 传代10代以内，遗传物质不改变，保持正常二倍体核型。 传代10-50代左右，增长缓慢以至于完全停止，部分细胞核型可能发生变化（遗传物质可能改变） 为什么用胰蛋白酶处理？ 分瓶传代培养 原代培养特点：细胞贴壁、接触抑制 继续传代培养少部分细胞获得不死性，细胞突变，遗传物质已经改变，等同于癌细胞。 细胞株：一般说遗传物质未改变 细胞系：遗传物质已改变 原代培养 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中据此思考： ? 1 .内环境稳态包括呢些方面？ 适宜的温度、pH值、渗透压、营养、氧气。 2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？ 无菌、无毒的环境。 3.体外培养细胞时需要提供哪些物质？如何才能保证类似于内环境的营养环境？培养基应是液态还是固态？ 充足的营养、适宜的温度、pH和气体环境。加入动物血清。培养基应是液态。 思考：动物血清的作用？ 主要是：提供有利于细胞生长增殖所需的激素、生长因子或提供合成培养基所缺乏的营养物质等。 保证细胞顺利的生长增殖 4、动物细胞培养条件 能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶？ 无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清、 微量元素等） 温度和PH 温度36.5+0.5度，pH7.2～7.4 气体环境 O2和CO2（95%空气和5%CO2） 离体培养的细胞对微生物和有毒物质没有防御能力。 保证细胞顺利的生长增殖 动物细胞培养液的主要成分： 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。 动物培养基特有的特点 （1）液体培养基 （2）含有动物血清 动物体细胞大都生活在液体的环境 植物组织培养呢？ 无机盐、蔗糖 、维生素、生长调节物质、植物激素 成分比较： 5.动物细胞培养技术的应用: 1.蛋白质生物制品的生产 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体 2.应用于基因工程 主要用于作为受体细胞 3.检测有毒物质，判断某种物质的毒性 4.细胞的生理、药理、病理研究