高效液相色谱法测定生物样品中绿原酸及其3种代谢产物的浓度.DOCVIP

时间分辨-液相微萃取-高效液相色谱法测定生物样品中绿原酸及其3种代谢产物的浓度 王婧 胡爽 白小红 研究药物代谢产物是阐明药物药理药效的重要途径，对指导临床应用和开发新药具有重要的意义。研究药物代谢产物的关键是生物样品分析，生物样品分析是指对血液、尿液、唾液、组织、粪便等生物性样品中的药物及药物代谢产物进行分析。由于生物样品成分复杂而且所含有的代谢产物浓度很低，除采用现代分析技术和分析仪器外，还需要借助高效分离、富集和浓缩的样品前处理技术与之相配合。本实验中采取的中空纤维液相微萃取法是在液-液萃取的基础上发展起来的，是一种灵敏度高，操作简单，快捷有效的样品前处理技术，特别适合于复杂样品中微量、痕量、超痕量物质的检测。 中空纤维液相微萃取法是将纤维管在有机溶剂中浸泡，使其孔壁充满有机溶剂，接收溶液注入弯曲成U形的纤维管中空内腔，再将纤维管浸入到样品溶液中进行萃取。这样中空纤维将接收溶液与样品溶液分隔开，不仅很好地保护了有机溶液不易脱落，增大了萃取表面积，还降低了有机溶剂溶解到样品溶液中的可能性，起到微孔过滤的作用。 血浆和尿液的成分复杂，黏度，乳化程度等不同对微萃取行为影响较大，因此绿原酸与代谢产物达到萃取平衡所需要的时间不同，绿原酸萃取达平衡时间大约是代谢产物达平衡时间的3倍，鉴于这样一种特点，本实验提出时间分辨-液相微萃取法提取、分离、纯化血浆和尿液中中药有效成分绿原酸及其3种代谢产物咖啡酸、对羟基桂皮酸、阿魏酸，结合高效液相色谱法测定其浓度。该法的使用延长了绿原酸在生物样品中测定的线性范围，提高测定的灵敏度，降低了检测限。初步揭示和讨论了绿原酸及其3种代谢物在生物体内的转化过程和生物样品及萃取过程乳化现象对萃取效率的影响。 本课题证明中空纤维液相微萃取是一种简单、可靠、快速、有效的样品前处理技术，证明了中空纤维液相微萃取技术用于中药和生物样品等复杂样品分析前处理的可行性，中空纤维液相微萃取作为复杂样品分析前处理技术提供了理论依据。