消栓口服液化学成分的变化.docVIP

消栓口服液化学成分的变化 摘要：目的：检测原工艺、发酵离心工艺、发酵醇沉工艺制备的消栓口服液中主要成分的含量变化。方法：采用HPLC法，以色谱峰面积为指标，比较不同制备工艺消栓口服液中黄芪甲苷、芍药苷、阿魏酸的含量变化。结果：发酵后黄芪甲苷的含量比原工艺组增加，而芍药苷和阿魏酸的含量减少。结论：不同工艺制备的消栓口服液主要化学成分的含量有所不同，微生物发酵技术可以为中药的开发利用提供新的思路。 关键词：消栓口服液；发酵；含量测定 消栓口服液为临床常用中药，它是在补阳还五汤的基础上研制的新剂型，具有补气活血、通络化瘀等功效。主治气虚血瘀引起的后遗症之半身不遂，口眼歪斜，言语不清，口角流涎，小便频数，下肢痿废，苔白脉缓以及脉络阻滞之疑难杂症[1]。消栓口服液是由黄芪、赤芍、川芎、当归、地龙、桃仁、红花7味药组成。方中重用黄芪补气，与活血化瘀药配伍，具有益气活血的功效，用以治疗气虚血瘀型中风[2]，具有良好的临床效果[3]。发酵是传统中药加工炮制的重要方法之一[4]，发酵中药借助微生物的作用，改变了中药原有药性，其主要特点就是发生了生物转化[5]。因此将微生物发酵技术引入中药，也就是将药材与辅料拌和，在一定温度和湿度下，通过微生物发酵可以达到提高药效、节约资源、降低毒副作用等目的[6]。目前，中草药发酵的研究已从单味药涉及到复方研究，并取得了显著成果[7]。本文对不同工艺制备的消栓口服液中3种主要成分进行含量测定，为消栓口服液的临床用药以及发酵中药的发展提供科学依据。 1仪器与试药 1.1仪器 Agilent#8202;1200#8202;series高效液相色谱仪，Alltech#8202;SD2000蒸发光散射检测器（美国安捷伦）等。 1.2试药与试剂 黄芪甲苷对照品（批号：110781-200613）、芍药苷对照品（批号：110736-200526）、阿魏酸对照品（批号：110773-200611），均购于中国药品生物制品鉴定所；消栓口服液、发酵离心工艺消栓口服液、发酵醇沉工艺消栓口服液，均由济南三株集团医药生物研究所提供；甲醇、乙腈为色谱纯；磷酸、醋酸等试剂均为国产分析纯；哇哈哈纯净水等。 2含量测定的方法与结果 2.1样品溶液的制备 2.1.1消栓口服液原工艺样品的制备分别精密称取黄芪、当归、赤芍、地龙、川芎、桃仁、红花7味药，加水煎煮2次，第1次1.5#8202;h，第2次为1#8202;h，合并煎液。滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.18~1.22（50#8202;℃），加乙醇使含醇量为75%，静置，取上清液，回收乙醇，浓缩药液至120#8202;mL[8]，加蔗糖54#8202;g，加热溶解，放冷，滤过，加苯甲酸钠0.9#8202;g，加水稀释至300#8202;mL，混匀，灌封，灭菌，即得[9]。2.1.2消栓口服液发酵后离心样品的制备分别精密称取上述7味药，同法煎煮，合并煎液。滤过，滤液减压浓缩至合适体积，配料，调pH，灭菌，接种噬酸乳杆菌、植物乳杆菌、短双歧杆菌，37#8202;℃培养24#8202;h，稳定化处理，离心，定容至750#8202;mL，分装，灭菌，即得。2.1.3消栓口服液发酵后醇沉样品的制备分别精密称取上述7味药，同法煎煮，合并煎液。滤过，滤液减压浓缩至合适体积，配料，调pH，灭菌，接种噬酸乳杆菌、植物乳杆菌、短双歧杆菌，37#8202;℃培养24#8202;h，减压浓缩至相对密度为1.18~1.22（50#8202;℃），加乙醇使含醇量为75%，静置，取上清液，回收乙醇，浓缩药液至适量，加蔗糖0.09#8202;g，溶解，放冷，滤过，加苯甲酸钠0.9#8202;g，加水稀释至300#8202;mL，混匀，分装，灭菌，即得。 2.2对照品溶液的制备 2.2.1黄芪甲苷对照品溶液的制备取五氧化二磷减压干燥24#8202;h的黄芪甲苷对照品适量，精密称定。加甲醇制成每1#8202;mL含0.6260#8202;mg的对照品溶液[10]。2.2.2芍药苷对照品溶液的制备取五氧化二磷减压干燥36#8202;h的芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1#8202;mL含芍药苷0.232#8202;mg的对照品溶液。2.2.3阿魏酸对照品溶液的制备取五氧化二磷减压干燥24#8202;h的阿魏酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1#8202;mL溶液含阿魏酸0.108#8202;mg的对照品溶液。 2.3供试品溶液的制备 2.3.1黄芪甲苷供试品溶液的制备精密量取3种工艺消栓口服液各20#8202;mL，用水饱和正丁醇振摇提取4次，每次20#8202;mL，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次30#8202;mL，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至5#8202;mL量瓶中，加甲醇至刻度，