间歇出酶对纸浆产纤维素酶的促进作用-生物加工过程.PDFVIP

第 １６卷第４期 生　 物　 加　 工　 过　 程 Ｖｏｌ１６ Ｎｏ４ ２０１８年７月 ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｊｕｌ． ２０１８ － ｄｏｉ：１０３９６９／ ｊｉｓｓｎ１６７２ ３６７８２０１８０４０１２ 间歇出酶对纸浆产纤维素酶的促进作用 王　 磊，王步成，勇　 强，余世袁 （南京林业大学 林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室，江苏 南京 ２１００３７） 摘　 要：为了提高分批补料制备纤维素酶的生产能力，本研究采用间歇出酶的方法，定期将部分酶蛋白从培养液中 分离出来，以达到高效产酶的目的。 在以里氏木霉为产酶菌、以纸浆为碳源的分批补料产酶过程中，从第４ 天开始 间歇出酶。 当每天取出１００％～２００％的酶液时，总滤纸酶活和总β 葡萄糖苷酶活分别提高２６３％～４０３％和 ６９８％～１０８９％。 为避免感染杂菌，菌丝体也可以不回收；当每天取出１５０％的酶液和菌丝体时，总滤纸酶活提高 ４２９％，总β 葡萄糖苷酶活提高８４３％，菌丝体质量浓度维持在４～５ ｇ／ Ｌ。 结果表明：只要菌丝体浓度维持在合理 范围内，间歇出酶可以保护已产出的酶蛋白，降低培养液中的产物浓度，从而大幅度提高产酶能力。 关键词：纤维素酶；分批补料；间歇出酶；里氏木霉；纸浆 － － － 中图分类号：ＴＱ３５１　 　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 　 文章编号：１６７２ ３６７８（２０１８）０４ ００７２ ０８ Ｐｅｒｉｏｄｉｃａｌ ｅｎｚｙｍｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｔｏ ｉｍｐｒｏｖｅ ｃｅｌｌｕｌａｓｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｐｕｌｐ ＷＡＮＧ Ｌｅｉ，ＷＡＮＧ Ｂｕｃｈｅｎｇ，ＹＯＮＧ Ｑｉａｎｇ，ＹＵ Ｓｈｉｙｕａｎ （Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ＆ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｎａｎｊｉｎｇ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００３７，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｐｅｒｉｏｄｉｃａｌ ｅｎｚｙｍｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｉｎ ａ ｆｅｄ⁃ｂａｔｃｈ ｃｅｌｌｕｌａｓｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ ｔｏ ｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｖｉｔｙ．Ｉｎ ｔｈｅ ｆｅｄ⁃ｂａｔｃｈ ｃｅｌｌｕｌａｓｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｐｕｌｐ ｂｙ Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｅｉ，ｐｅｒｉｏｄｉｃａｌ ｅｎｚｙｍｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ｓｔａｒｔｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｆｏｕｒｔｈ ｄａｙ．Ｗｈｅｎ １００％ ｔｏ ２００％ ｏｆ ｃｅｌｌｕｌａｓｅ ｗａｓ ｒｅｃｏｖｅｒｅｄ ｄａｉｌｙ，ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｆｉｌｔｅｒ ｐａｐｅｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄβ⁃ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｂｙ ２６３％ ｔｏ ４０３％ ａｎｄ ６９８％ ｔｏ １０８９％， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｗｈｅｎ １５０％ ｏｆ ｅｎｚｙｍｅｓ ａｎｄ ｍｙｃｅｌｉａ ｗｅｒｅ ｒｅｍｏｖｅｄ ｄａｉｌｙ，ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｆｉｌｔｅｒ ｐａｐｅｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ － β⁃ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｂｙ ４２９％ ａｎｄ ８４３％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｗｉｔｈ ｍｙｃｅｌｉａ ｋｅｐｔ ａｔ ４ ５ ｇ／ Ｌ． Ｐｅｒｉｏｄｉｃａｌ ｅｎｚｙｍｅ ｒｅｃｏｖｅｒ