寄生于鲤4种碘泡虫的分类学研究-水产养殖专业论文.docxVIP

分类号 分类号 密级 华中农业大学硕士学位论文 寄生于鲤4种碘泡虫的分类学研究 TAXoNoMIC STUDY OF 4 M珊BD乞【愿SPP．FROM THE COMMON CARP(CYPRINUS CAeaIO) 研究生：黄明军 学 号：2011308110048 指导教师：顾泽茂副教授 专业：水产养殖 研究方向： 水产动物医学 获得学位名称：农学硕士 获得学位时间：2014年12月 华中农业大学水产学院 二。一四年十二月 万方数据 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 乃’ 如需保密，解密时间 年 月 日 是否保密 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下迸行的研究工作及取得的研究成 果。尽我所知，除了文中特勇4加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他入已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大q-或其他教育机构的学位或证书 而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任 『何贡献均已在论文中做了髓确的说明，并表示了谢意。 研究生张爱蚂牟1-7 帆扣吁年，二月弓日 黼鲐如军锄张如坻 签名日期：沙f，年f 1月弓日 签名日期：卅年／文月多 日 万方数据 寄生于鲤4种碘泡虫的分类学研究 寄生于鲤4种碘泡虫的分类学研究 目 录 摘要 ． 一i Abstract．．．．．．．．．．．．．．．． ． ．．．． ．．．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ． ． ．． ．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．iii 1前言 ．1 1．1粘孢子虫分类学研究现状 1 1．1．1粘孢子虫的分类系统 ．1 1．1．2粘孢子虫的起源问题 ．3 1．1．3粘孢子虫属阶元的归属问题 ．4 1．1．4粘孢子虫种类的误鉴 ．s 1．2粘孢子虫分类方法 7 1．2．1形态学分类方法 ．7 1．2．2分子生物学分类方法 ．8 1．3研究目的 一11 2材料与方法 ．12 2．1样品收集及预处理 一12 2．2粘孢子虫形态学研究 12 2．3组织病理切片的制备和观察 ～13 2-3．1取材和固定 13 2．3．2组织脱水、透明、渗透与包埋 13 2．3．3切片与摊片 14 2．3．4染色、封片与结果观察 14 2．4基因组DNA的提取、PCR扩增与测序 15 2．4．1基因组DNA的提取 ．15 2．4．2 PCR扩增 15 2．4．3 PCR产物测序 16 2．5系统发育分析 一16 3结果 17 3．1苍梧碘泡虫 ．．17 3．1．1苍梧碘泡虫的形态学 17 3．1．2组织切片观察 17 3．1．3分子生物学分析 17 3．2葡萄碘泡虫 一23 3．2．1葡萄碘泡虫的形态学 23 3．2．2组织切片观察 23 3．2．3分子生物学分析 23 3．3似葡萄碘泡虫 一29 3．3．1似葡萄碘泡虫的形态学 29 3．3．2分子生物学分析 29 3．4陈马碘泡虫 一33 3．4．1陈马碘泡虫的形态学 33 3．4．2分子生物学分析 33 4讨论 36 4．1苍梧碘泡虫 一36 4．2葡萄碘泡虫 。38 万方数据 华中农业人学2014届颂，I：研究生学位(毕业)论文4．3似葡萄碘泡虫 华中农业人学2014届颂，I：研究生学位(毕业)论文 4．3似葡萄碘泡虫 一40 4．4陈马碘泡虫 ．．41 参考文献 44 I咐录 54 致谢 55 万方数据 寄生于鲤4种碘泡虫的分类学研究摘要 寄生于鲤4种碘泡虫的分类学研究 摘要 2012．2013年在湖北省汉江平原和重庆澎溪河流域从鲤的鳃和鳍分别采集到 4种碘泡虫。采用形态学和分子生物学方法对其进行分类学研究。主要结果如下： l、根据形态学、分子生物学及组织学特征，重新描述了苍梧碘泡虫和葡萄 碘泡虫。 (1)苍梧碘泡虫(Myxobolus tsangwuensis Chen，1954)寄生于鲤鳃小片的毛 细血管内。成熟孢子壳面观椭圆形，缝面观柠檬状，孢子长11．2士0．7(10．2．12．5) 炉，宽9．3士0．3(8．5一10．0)岬，厚6．2士0．4(5．5—7．0)岬。无囊间突或偶发现有较 小的囊间突，壳瓣光滑。两个梨形极囊大小不等，大极囊长5．0士0．2(4．4．5．3)岬， 宽3．1士0．1(2．9．3．5)岬，极丝5．7圈。小极囊长3．9士0．2(3．4-4．3)岬，宽2．5土0．2 (2．0—2．8)岬，极丝3-4圈。观察到有带粘膜的孢子和少数带有尾突的孢子。利用 引物18e／18r扩增获得1,890 bp的18S rDNA序列，在Genbank中BLAST显示： 在目前可得的序列中，没有与苍梧碘泡虫的1 8S rDNA序列完全一