环磷酰胺调控Treg基础上免疫治疗的抗瘤实验研究-外科学专业论文.docx

10111Iilli／IIIIIIllllII／111111]11111IllIIll唧Y1 10111Iilli／IIIIIIllllII／111111]11111IllIIll唧 Y1 801 944 目 录 中文摘要 l 英文摘要 6 英文缩写 12 研究论文环磷酰胺调控Treg基础上免疫治疗的抗瘤实验研究 引言 14 第一部分循环应用低剂量环磷酰胺对荷瘤小鼠Treg的影响 前言日IJ吾 1。66 材料与方法 1 6 结果 22 附图 24 附表 29 讨论 30 小结 32 参考文献 32 第二部分循环应用低剂量环磷酰胺联合树突状细胞疫苗的抗瘤作用 前言月lJ吾 36jO 材料与方法 37 结果 42 附I蛩 44 附表 48 讨论 49 ／4、结 52 参考文献 52 第三部分循环应用低剂量环磷酰胺联合CTLs过继免疫治疗的抗瘤作用 ．前言．日IJ舌 ．．．． ．．)O56 材料与方法 ．．57 结果 62 附图 ．．64 附表 ．67 讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．68 讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．68 小结 70 参考文献 ．．71 第四部分循环应用低剂量环磷酰胺联合DC疫苗、CTLs过继免疫治疗的 抗瘤作用 前言日lJ舌 3636 材料与方法 ．76 结果 8 1 附图 83 附表 85 讨论．．．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．86 小结 88 参考文献 88 结论 92 综述CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞与肿瘤免疫 93 致谢 ．11 5 个人简历 ．116 中文摘要环磷酰胺调控Treg基础上免疫治疗的 中文摘要 环磷酰胺调控Treg基础上免疫治疗的 抗瘤实验研究 摘 要 目前肿瘤免疫治疗的研究重点集中在打破肿瘤免疫耐受和提高效应 性T细胞反应。各种类型的肿瘤疫苗和过继性细胞免疫治疗逐渐进入临 床应用阶段，并取得了阶段性的成果。其具有代表性的治疗如树突状细胞 (dendritic cells，DCs)疫苗和体外培养的各类效应性T细胞的过继回输。 然而在临床实践中，特别是对于那些己长成的血管化实体瘤，其单独应用 的实际总体有效率均未超过30％。故目前国内外的肿瘤免疫治疗多停滞 于I、II期临床试验。这是因为肿瘤微环境中复杂多变的免疫抑制网络限 制了免疫治疗的实际效果，其中的抑制因素是困扰肿瘤免疫治疗的关键。 近年来随着肿瘤免疫基础研究的发展，虽然仍未完整阐明肿瘤的免疫抑制 网络，但其中的重要节点1D4+CD25+FOXP3+调节性T细胞(regulatory T cells．Treg)的作用日益受到重视。 在荷瘤机体内，CD4+CD25十FOXP3+Treg数量明显升高。越来越多的 证据表明了无论在肿瘤环境下还是在抗肿瘤免疫中，Treg都扮演了负面 角色。荷瘤机体内Treg的增加成为肿瘤免疫耐受，导致肿瘤免疫逃逸和 限制肿瘤免疫治疗疗效的重要原因之一。所以对Treg进行针对性地调控 成为肿瘤免疫治疗的重要环节。目前在欧美日等发达国家，调控Treg的 措施已进入临床试验阶段，而国内的相关研究基本处于极少量的临床前实 验阶段。 环磷酰胺作(cyclophosphamide，CTX)为常规化疗药，被广泛应用于 临床。CTX除了直接的细胞毒作用以外，还同时具有免疫调节方面的功 能。近年来国外相关动物实验研究证实低剂量的CTX能够选择性地删除 CD4+CD25+FOXP3+Treg，其删除作用具有时间和剂量依赖性。目前较一 致的研究结果认为单次应用CTX后3-4天，Treg数量下降至最低水平，7 天后逐渐恢复至正常水平。但CTX的应用都局限为单次给药，且有关CTX 的最佳剂量、与免疫治疗的具体联合方式不尽相同。单次应用CTX(single administration)清除Treg的时间是短暂的，而在临床的免疫治疗中多为连 中文摘要续或循环应用疫苗或过继回输效应性T细胞，如果能够延长抑制Treg的 中文摘要 续或循环应用疫苗或过继回输效应性T细胞，如果能够延长抑制Treg的 时间(即在连续的免疫治疗时间段内保持Treg的相对低水平)可能将取 得更好的效果。