生化分析仪的校准.pptVIP

生化分析仪的校准 重庆医科大学检验系 陈 宏 础 一个实验室测定结果的可靠性是由其精密度、准确性及可比性所决定的，一般必需从下几方面着手。 1. 选好测定方法； 2. 购买质量过硬的试剂盒； 3. 要有质优的测试仪器； 必需进行正确的校准； 还要规范化操作； 搞好过硬的室内质量控制； 积极参加室间质评活动； 还要有一支素质高的队伍； 现就生化分析仪的校准问题提出个人看法。 一、校准的重要性和必要性 首先必须明确生化分析仪不论如何先进，它还是一个比较器，它测试出来的标本结果是随着标准限的设置不同而变化的。 二、确立仪器标准测定系统的概念 对于一个临床检测项目，测定系统包括测定原理、试剂、仪器、校准品四要素。在全自动生化分析仪上使用配套的试剂和标准品，即日立7170使用Roche的试剂和校准品（c.f.a.s），在贝克曼CX-7生化分析仪上使用贝克曼的试剂和校准品等。各仪器厂家均有自己的标准测定系统。对于校准品不能乱用，如：绝对不能用贝克曼的校准品校准日立生化仪，同样也不能用宝灵曼的校准品去校准贝克曼生化仪。 三、校准品和质控品 校准品（Calibration materials）含有已知量的欲测物，用以校准该测定方法的数值，它与该方法及试剂、仪器是相关联的。校准品的作用是为了减少或消除仪器、试剂等造成的系统误差。因此最好为人血清基质，以减少基质效应造成的误差。 质控品（Control materials）只用于和待测标本同时测定的，为了控制标本的测定误差，因此要求保存时间十分稳定。前者是校准其值而后者是控制误差用的。 四、校准前准备 1. 了解灯泡已使用多久？检查飘移是否合乎要求； 2. 检查比色杯的清洁及磨损情况？必要时进行更换； 3. 用清洁剂泡洗管道 4. 测定仪器的精密度及线性是否达到仪器性能要求？ 五、定值质控血清是否可以校准仪器？ 我们在相同条件下，同时用五个进口产品，每家两种不同浓度的定值如TP、ALB、UREA、UA、ALP、GGT、CK、HBDH、LD、AMY等。 表 不同厂家定值质控品对TP、ALB、、AST、ALP结果与靶值比较 通过上述结果比较，说明不同厂家生产的定值质控血清靶值之间有的相差较大，提示我们决不能用定值质控血清代替校准品作校准用。 六、校准方法 例如日立(Hitachi)系列您必须购买Roche的试剂及其校准品c.f.a.s.(Calibrator for automated systems)，同时准备10至20份新鲜血清。按Roche试剂盒内的说明书设置参数，用c.f.a.s.校准血清进行校准，即可获得各项目的校准K值，同时观察一下各项目测定时反应进程图，检查各项目参数设置是否在最佳位置，如不在最佳位置应予以重新设置并测定。此时得到的K值即为准确的校准K值，然后测定待测的10至20份新鲜血清三次取其平均值，应该说此结果是用Hitachi-Roche检测系统所获的测定值。然后用此血清值校准其它测定系统。 七、关于酶活性测定校准问题 酶活力（U/L）=△A/min×V×106/(ε×v×L) 令k=V×106/（ε×v） 则酶活力（U/L）=△A/min×K 常用K值有以下几种： a)?? 理论K值：根据理论摩尔消光系数（ε）来计算，如NADH为6.22×103 b)??实测K值：由于仪器波长的精密及半宽度不同，而应根据实测ε值来设定K值 c)??厂家给的K值：厂家生产试剂盒说明书上提供的K值（有的厂家提供6.3×103） d)??校准K值：通过校准物直接校准得到的K值 在日立7170A全自动生化分析仪上可以得到几种不同的酶K值，见下表 表 日立7170A全自动生化分析仪上用不同方法 得到几种酶的K值 *从上述K值中不难发现实测K值大于理论K值，这说明生化分析仪的测光系统还存在着一定误差，如波长、半宽度及光径等偏差，使仪器达不到理论上的最佳状态； *校准K值与实测K值之间也存在一定的差距，即使指示物和仪器相同，其差异可能由试剂及校准品造成的； *作者认为最好使用校准K值，但必须由两个先决条件：1必须使用配套的试剂；2必须使用配套的高质量的校准品，但校准K值应有其溯源性。 关于酶活标准品，欧洲标准局（BCR）和美国国家标准技术研究院（NIST）均发表了人血清基质的酶活性CRM（有证参考品）和SRM（标准参考品），日本又提出ERM（酶参考品）。 日本ERM溯源为JSCC常用基准法，若用IFCC推荐法在37°C下定值在日本称为IFCC SOP法。 欧共体的CRM溯源于IFCC推荐法。 八、必须拟订校准计划（文件）