高通量药物筛选与创新药物研究--国家新药筛选中心.doc

高通量药物筛选与创新药物研究--国家新药筛选中心 Microplates from Corning Matrix of Wells 864 96 384 1536 Well Row Column Volume 96 8 12 300 384 16 24 100 1536 32 48 10 Microplates 微孔板的颜色和材料 颜色类型 应用 透明 光吸收检测 不透明 黑色荧光检测 白色化学发光检测 底部透明 细胞实验底部检测 材料类型 应用 聚苯乙烯PS 疏水性透明度高多用于筛选板 聚丙烯 PP 化学稳定性高适合化合物储存 UV透射材料 光吸收率低适合UV检测 Microplates 微孔板微孔的设计和密度 微孔板微孔密度的增加可以显著提高单位时间内筛选的通量 节约成本 提高筛选质量 微孔密度 96孔 384孔 1536孔 3456孔 微孔容积 75-250 mL 20-100 mL 2-10 mL 1mL Microplates 微孔板材料的表面处理 类型 应用 与生物分子无亲和力 Corning公司NBSTM微孔板均相生化测试 与生物分子高亲和力 非均相测试 例如ELISA DELFIA 为细胞组织培养特别处理 Corning公司的CelllBind微孔板提高细胞贴壁性 多聚赖氨酸表面 超低细胞亲和力表面降低细胞贴壁能力 共价处理表面 与DNA碳链巯基有特异的亲和力 微孔板设备 一般而言一个自动化筛选系统的大多数组件总是围绕微孔板而工作的它们均可称为微孔板设备 独立单元Stand-alone指象洗板器液体分配器Liquid Dispenser和酶标仪等 工作站Workstation能执行多重功能通常指围绕微孔板的部分 如液体转移装置Liquid Handling可围绕微孔板执行多重功能 History –1980s Zymark 世界上第一台工作站是由Zymark公司开发的BenchmateTM系统它集成了精密天平单通道加液头移液装置振荡器和HPLC进样器等通过一个机械臂可以将不同的容器从一个工作台移至另一个工作台但这一系统主要是针对管形反应器设计而设计的并不适用于今天的微孔板 第一台基于于微孔板设计的工作站是由Beckman Coulter开发的Biomek1000它整合了单通道和多通道的吸液加液洗涤和单通道检测密度测定等组件部分 Biomek2000 使用可变换工具后变得更加灵活如不同的吸收器分配器等其特点是可以针对不同的需要设计不同的操作程序 BiomekFX集成了更强大的功能如多通道可同时亦可执行不同的任务双手臂操作则更是增加了有效性和操作速度 Biomek 2000 Automation Workstation 自动化液体分配装置 Beckman Biomek FX 96-channel pipetting head High-capacity for simultaneous liquid transfer Span-8 pipettor Flexible with individual movement and liquid sensing capability for hit picking and plate reformatting 检测系统 UV-visible Light Absorbance Fluorescence Fluorescence Intensity Time-resolved Fluorescence TRF Fluorescence Polarization FP Luminescence Radioactivity Microplate Readers Spectra Plus 384 UV absorbance Continuous 190 - 1000 nm Reads 96 wells 5 sec 384 wells16 sec Spectra Gemini XS Luminescence fluorescence and time-resolved fluorescence Continuous 250-850 nm Read 96 wells 27 sec 384 wells 2 min 30 sec VICTOR2 V Multi-label Reader Filter-based instrument Five technologies Absorbance Luminescence Fluorescence Time-resolved fluorescence Fluorescence polarization Microplate reader 最新的微孔板