db33t6002006蔬菜、水果中吡虫啉残留量测定方法.docVIP

DB33/T 600—2006 PAGE II PAGE 1 浙江省质量技术监督局发布2006-03-08 浙江省质量技术监督局发布 2006-03-08实施 2006-02-07发布 蔬菜、水果中吡虫啉残留量测定方法 Method for determination of imidacloprid residues in vegetables and fruits DB33/T 600—2006 DB33 浙江省地方标准 ICS 67.050 X 04 备案号： Ⅰ 前 言 本标准由浙江省质量技术监督局提出并归口。 本标准起草单位：农业部农产品质量监督检验测试中心（杭州）、浙江省标准化研究院。 本标准主要起草人：朱亚红、王小骊、胡秀卿、吴珉、吴桂仙、李宁。 DB33/T 600—2006 PAGE 1 蔬菜、水果中吡虫啉残留量测定 1 范围 本标准规定了用高效液相色谱测定蔬菜、水果中吡虫啉残留量的方法。 本标准适用于蔬菜、水果中吡虫啉残留量的测定。 本方法检出限为0.01 mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 样品中吡虫啉用甲醇提取，提取液经氯化钠水溶液盐析，C18固相萃取（SPE）小柱净化，高效液相色谱仪紫外检测器(UV)检测，根据保留时间定性，外标法定量。 4 试剂 除非另有说明，在分析中均为分析纯试剂和GB/T 6682中规定的至少二级的水。 4.1甲醇。 4.2甲醇，色谱纯。 4.3二氯甲烷。 4.4 乙腈。 4.5石油醚:沸程60℃~90 ℃。 4.6乙酸乙酯。 4.7盐酸溶液:c（HCl）=6 mol/L 用浓盐酸兑水稀释而成。 4.8 氯化钠水溶液：称取50g氯化钠加入1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。 4.9吡虫啉标准溶液：100 mg/L。 4.10吡虫啉标准工作液：使用时用甲醇（4.2）稀释成质量浓度0.05 mg/L ~1.0 mg/L。 4.11无水硫酸钠：350 ℃灼烧2 h，冷却后置干燥器备用（0℃-4℃密封保存三个月）。 仪器 5.1高效液相色谱仪带紫外检测器。 5.2组织捣碎机。 5.3高速匀浆机高速匀浆机：4000 r/min。 5.4旋转蒸发器。 5.5 C18固相萃取（SPE）小柱（500 mg，6 mL）。 6 试样制备 蔬菜、水果样品取可食部分切碎、混匀备用。 分析步骤 提取 称取20.0g试样，放入250 mL平底锥形瓶，用100 mL甲醇（4.1）浸泡30 min后在高速匀浆机匀浆提取，提取时间为2 min ，用布氏漏斗抽滤，滤液倒入500 mL分液漏斗，残渣倒回平底锥形瓶，再加80 mL甲醇（4.1），继续在高速匀浆机匀浆提取1 min ，用以上布氏漏斗过滤，滤液并入分液漏斗，加入100 mL氯化钠水溶液（4.8）、50 mL石油醚（4.4）振摇1min，静止分层，下层水相放入另一分液漏斗，石油醚液用50 mL氯化钠水溶液（4.7）反萃取一次，弃去石油醚液，合并水溶液。在水溶液中加入0.5 mL盐酸溶液（4.8），摇匀，再分别用40 mL、20 mL、20 mL二氯甲烷（4.3）萃取三次，合并二氯甲烷层，经无水硫酸钠（4.11）脱水，过滤到250 mL平底烧瓶中。滤液在40℃下减压浓缩至1 mL ~2 mL，再用氮气吹干。 7.2 净化 取Ｃ18固相萃取(SPE)小柱（4.12），再用10 mL甲醇（4.1）预淋柱子，并用吸耳球排出柱中溶剂，用10 mL去离子水淋洗，再用吸耳球排出柱中水分。上述浓缩试样用4 mL石油醚＋乙酸乙酯（8.5：1.5 ）溶解并移入小柱，弃去淋洗液。再用石油醚＋乙酸乙酯（3：7 ）洗脱，收集10 mL，50 ℃下减压浓缩至1 mL ~2 mL，用氮气吹干，再用甲醇（4.2）转移10 mL刻度细管至刻度，待测。 7.3. 液相色谱条件 7.3.1色谱柱：Ｃ18, ODS 柱 4.6 mm×250 mm×5μm。 7.3.2流动相：乙腈＋水（40：60），流速：1.0 mL/min。 7.3.3吸收波长：270 nm。 7.3.4柱温：室温。 7.4 测定 分别吸取20 μL标准溶液和试样溶液，注入液相色谱仪，以保留时间定性，根据试样峰面积，确定吡虫啉相近的标准工作液质量浓度，使响应值在仪器的检测线性范围内，用外标法定量。 7.5 空白试验 除不加试样外, 均按上述步骤进行。 8 结果计算 试样中吡虫啉含量用质量